用什麼酶切割運載體
❶ 用同種限制酶切割運載體與目的基因的dna片段或相同黏性末端
A、用同種限制酶切割運載體與目的基因可獲得相同的黏性末端,這樣便於目的基因與運內載體連接形成重組容DNA分子,A正確;
B、限制酶的作用部位是脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵,B錯誤;
C、基因工程在農作物育種、葯物研製等方面都有很重要的應用,C正確;
D、基因工程所用的工具是限制酶、DNA連接酶和運載體,D正確.
故選:B.
❷ 目的基因和運載體不是應該用同種限制酶切割的嗎為什麼這個題用不同種
目的基因和運載體不是應該用同種限制酶切割的
A、限制性內切酶能夠識內別雙鏈DNA分子的某容種特定核苷酸序列,並且切割形成特定的粘性末端,A正確;
B、真核生物基因有編碼區和非編碼區之分,並且編碼區包括外顯子和內含子,而以蛋白質的氨基酸序列為依據合成的目的基因只包含外顯子,沒有內含子和非編碼序列,因此與原基因的鹼基序列不同,故B錯誤;
C、目的基因在受體細胞中成功表達才表示基因工程操作成功,僅僅檢測到受體細胞含有目的基因,並不代表該基因可以正常的轉錄和翻譯,故C錯誤;
D、質粒中抗生素抗性基因一般用於檢測目的基因是否成功導入受體細胞中,故D錯誤.
❸ 運載體為什麼必須具備多個限制性酶切位點
作為載體,我們期望它可以運載不止一種外源基因片段,而不同基因片段對dna內切酶的要版求或偏好是不權一樣的,因為不同基因其dna序列存在差異。所以針對差異,僅有可能只有一種內切酶可以達到完美切割的效果,而載體也必需要用同一種酶切割保證切口可以無縫對接。一個質料載體要具有攜帶多種外源基因的能力就必需具備多個限制性內切酶的位點。
❹ 為什麼用相同的限制酶切運載體和目的基因
不同的限制酶的切口不同,不同的切口無法連接.
❺ 1.將目的基因和運載體連接起來需要哪些工具對限制酶的原則上的要求是什麼
基因工程中,構建基因表達載體時,首先用同一種限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體,以產生相同的黏性末端,其次再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子.
故選:B.
❻ 是否可以用不同的限制酶分別對含目的基因的DNA和運載體進行酶切處理理由是
通常只用一種限制酶。
用不同類型的限制酶切割DNA後,可能產生黏性末端,也可能產生平末端。
若要在限制酶切割目的基因和質粒後使其直接進行連接,則應選擇能使二者產生相同黏性末端的限制酶。
❼ 今日課堂作業:用同一種限制酶切割運載體和目的基因,他們有哪些連接方式
具有相同黏性末端的DNA會連接在一起。因此用同一種限制酶切割運載體和目的基因,有3種連接方式:目的基因和目的基因連接、目的基因和運載體連接、運載體和運載體連接。
❽ 為何通常用兩種限制酶同時切割目的基因和運載體
兩種不同復的限制性內切酶制識別並切割的序列是不同的,也就是兩種酶分別切割了基因和載體時,產生了兩個切口,這兩個切口不是粘性末端,不能互補配對,所以不可能連接在一起,如果用一種酶來切那麼這樣基因中或者是載體上就會有相同的粘性末端,這樣基因本身除了切下來的那段之外,剩下的部分在連接酶作用下相同的粘性末端就會配對連接,同樣載體也會繼續連接成環,基因和載體連在一一起也有,而且首尾的順序也有兩種,連接體系跑電泳結果會有4個條帶,至少是4種,而且就算那個連接後的片段大小符合你要求的那段純化後也有一部分是不能表達的.哪四種就不用寫了,你肯定知道的,不能表達的那部分就是順序不對的,這就是同種酶切連接的缺陷性.
❾ 用同一種限制酶切割後的運載體與目的基因連接方式有
3種是考慮兩兩相互連接形成的,具體的目的基因之間和目的基因與運載體之間以及運載體之間。因為同一種限制酶切下的粘性末端是相同的,可以實現鹼基互補配對。
❿ 切割運載體和目的基因往往是用同一種限制酶還是兩種
往往是一種。不過我看為了准確,兩種更好一點。用同一種的話,可能會自身環化