如何將BamH一切割的載體

❶ 誰用過TAKARA的AFLII，我載體是AFLII和BamHI酶切，片段是AFLII和BgLII雙切，老是連接不上，幫幫忙

1、首先你得確來定你的載體和目自的基因的質粒有沒有問題；酶以及水等是否有污染
2、要能確定你是否雙切開了，有可能根本沒切開或者只切開了一段
3、如果都切開了，那是否你膠回收濃度很低，以致不能保證連接所需的濃度
4、你說轉化沒問題，那就考慮前三個就可以了

❷ bamhi hindiii酶切位點

這個基於你的片段中的酶切位點,如果你的片段中含有和載體中位點一致的序列,那你就不能取這個位點,因為酶切時會把你的片段切開,可以選你的片段中沒有的位點,設計引物

❸ 哪個T載體上沒有SacI和BamHI這兩個酶切位點

Takara公司的pMD19T simple載體，貨號為3271.

T-Vector
pMD19 (Simple) 是兩側的3』 端添加了 「T」 的線性化載體，因版大部分耐熱性DNA聚合酶進行權PCR反應時都有在PCR 產物的3』
末端添加一個 「A」 的特性，所以使用本製品可以大大提高PCR產物的連接、克隆效率。本載體盡管消除了LacZ基因上的多克隆酶
切位點，但不影響β-半乳糖苷酶的正常表達，因此，PCR產物克隆後仍可以利用α-互補性進行藍白菌落的篩選，挑選陽性克隆。由於本載體上消除了多克隆酶
切位點，克隆後的PCR產物將無法使用載體上的限制酶切下，需要在PCR擴增引物上導入合適的酶切位點。本製品中的Control Insert
(500 bp) 還可以用於Control反應。

pMD19T simple載體圖譜如下：

更多pMD19T simple載體信息，請見http://www.biofeng.com

❹ 假設一基因表達載體上僅有EcoR1限制酶和BamH1限制酶的切割位點（個數未知）

BamH1EcoR1 5.5kb 6kb
頭------BamH1---------EcoR1---------BamH1---尾
頭尾是相連成環形 中間有2.5kb

❺ bamh i和xba i是雙酶切嗎 載體是puc18

你好，尊敬的網路知道用戶朋友，很高興為你解答問題！

都不是的，他們都是採用了另一種的切割方式的

如果您還有疑問請繼續詢問，很高興為您解答！

❻ pET15b空載用Nde I和BamH I酶切怎麼才算切完全

切三小時應該就差不多了 你切完跑膠回收 旁邊點一道沒有切的載體 對照著看就知道哪條是切開的了

❼ 我用pETDuet-1 這個載體的BamHI和XhoI酶切可以嗎

斐林試驗主條目：抄斐林試劑（新制氫氧化銅）（甲液：0.1g/ml的NaOH 乙液：0.05g/ml的CuSO4） 注意事項：1.還原糖主要有葡萄糖、果糖、麥芽糖 2.甲乙兩液必須等量混合均勻後再加入樣液,現配現用 3.必須用水浴加熱[1] 斐林試驗大致和本納德試驗相同,只是將本納德試劑中的硫酸銅和酒石酸鈉分開為兩種試劑.葡萄糖驗證：驗證醛基 1.葡萄糖溶液與新制氫氧化銅濁液反應生成磚紅色沉澱 CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加熱→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O如果溶液中還原糖含量較低,產生的氧化亞銅便會較少,試驗後只會有綠色、混濁的黃色或橙色等.在酸性環境中,Cu2 會變得較為穩定,不容易發生反應,所以不能進行試驗.醇和醛在這測試亦會產生磚紅色沉澱物,因為兩者都具有在這試驗中產生作用的官能團.

❽ 載體雙酶切後消失，怎樣解決

fermentas 目錄上有,bamh1 ph大於8.0時有很強的星號活性，bufferR ,ph 8.5,可以換buffer G試下

❾ 我想用puc19克隆目的基因，如果用HindIII和BamHI酶切位點的話，我的目的基因N端會帶上多長的來自於載體的

斐林試驗
主條目：斐林試劑（新制氫氧化銅）（甲液：0.1g/ml的NaOH 乙液：0.05g/ml的CuSO4）回 注意事項：1.還原答糖主要有葡萄糖、果糖、麥芽糖 2.甲乙兩液必須等量混合均勻後再加入樣液，現配現用 3.必須用水浴加熱[1] 斐林試驗大致和本納德試驗相同，只是將本納德試劑中的硫酸銅和酒石酸鈉分開為兩種試劑。 葡萄糖驗證：驗證醛基 1.葡萄糖溶液與新制氫氧化銅濁液反應生成磚紅色沉澱 CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加熱→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O如果溶液中還原糖含量較低，產生的氧化亞銅便會較少，試驗後只會有綠色、混濁的黃色或橙色等。 在酸性環境中，Cu2 會變得較為穩定，不容易發生反應，所以不能進行試驗。 醇和醛在這測試亦會產生磚紅色沉澱物，因為兩者都具有在這試驗中產生作用的官能團。

❿ 如何在引物中加入HindⅢ和BamHI酶切位點

先設計好正反引物，順序是5到3，分別在5端加上hindIII和BamHI的酶切位點就可以了。
比如:
正向引物專F:AAGCTT-atgcatgctgcatgcatgc
反向屬引物R:GGATCC-catgcatgatgcacatgcta
按照試驗的具體情況，還可以在前面加上保護鹼基，這個你在網上可以搜到。如果連T載體再酶切的話，就沒什麼必要了。