怎麼切割目的基因與載體

A. 在基因表達構建載體中什麼切割質粒什麼切割目的基因，為什麼

質粒是一個閉合的DNA圓圈，你得先切開它，把它切成一條線；然後你再從一長串專DNA上切下你要的目的片段，屬用連接酶像膠水一樣，吧質粒的兩端和目的片段的兩端連接起來——又成一個圓圈了，但是這次這個DNA圓圈已經含有你要的片段了。

由於載體質粒只有圓圈狀才有活性，才有用，所以你必須這么做。。。

B. 獲得目的基因後要與載體連接，那麼目的基因還要剪切過嗎要是不剪切，就沒有粘性末端，怎麼與載體連要

通常擴增基因所使用的引物兩端會人為添加特異的酶切位點，連接過程中的酶切過程不影響基因本身的編碼序列。

C. 基因工程中切割載體和含目的基因的DNA片段是需使用同種限制酶是為什麼是怎麼切割怎麼連的，能不能簡述

所用的同種限制酶是限制性內切酶，也叫做內切酶，至於具體用哪回個內切酶，要根據答你要切的序列進行分析，分析的軟體很多，比如OMIGA，MEGA，primer premier......
至於怎麼切割怎麼連，下面已經說的很清楚了，簡說，就是識別-切割-連接。

基因工程的主要步驟：
1.目的片段的分離與合成，獲得目的片段
2.目的片段與載體連接（載體有兩種，一種叫做克隆載體，為了大量獲得該片段，並對在片段在基因層面進行研究；另一種叫做表達載體，為了將目的片段翻譯成蛋白，對蛋白進行研究）；
3.含有目的片段的載體導入宿主細胞內
4.對宿主進行檢測和篩選，主要檢測是否導入成功，和導入的基因是否你所要的；

D. 在基因表達構建載體中什麼切割質粒什麼切割目的基因,為什麼

質粒是一個閉合的抄DNA圓圈襲,你得先切開它,把它切成一條線；然後你再從一長串DNA上切下你要的目的片段,用連接酶像膠水一樣,吧質粒的兩端和目的片段的兩端連接起來——又成一個圓圈了,但是這次這個DNA圓圈已經含有你要的片段了.
由於載體質粒只有圓圈狀才有活性,才有用,所以你必須這么做.

E. 基因工程中 切割目的基因和載體所用的限制酶及切口必備的特點

在基因工程操來作中為了獲得源重組質粒，一般用相同的限制性內切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，以露出相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接形成重組質粒；也可以用不同的限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，但露出的粘性末端相同，再用DNA連接酶連接．
故選：A．

F. 在什麼情況下，切割目的基因和載體時使用不同種限制酶

如果要獲得互補的缺口用於連接，而載體或目標片段上又有多個酶切位點，如果有同尾酶的話就可以使用。一般情況下切割載體和目的基因需要使用相同的酶，偶爾也會使用不同的同尾酶。

G. 用同種限制酶切割目的基因和載體，有多少種連接方式

用同種限制酶切割目的基因和載體，有三種連接方式。載體的自身環化，目的基因的自身環化，載體和目的基因的連接。

H. 構建好的載體 怎麼把目的基因切掉 重做

一般構建載體時，會將目的基因和載體用相同的內切酶切出一定的序列，再用連接酶連接而成；所以想切掉目的基因很簡單，就是再用之前的內切酶進行切除就好了。

I. 限制酶切割目的基因和載體用同一種酶，但是目的基因切兩個割下來 ，載體只切一刀，怎麼用同種酶

限制酶切割目的基因和載體用同一種酶，但是目的基因切兩個割下來 ，載體只切一刀，怎麼用同種酶？？？
分子生物學 生物化學 微生物 脫氧核糖核酸（DNA） 生

J. 基因工程中,切割目的基因和載體

切割載體和含有目的基因的DNA片段後形成的黏性末端，只有存在互補序列才能連接形成重組DNA片段，欲獲得存在互補鹼基序列的黏性末端一般需使用同種限制酶切割．
故選：A．