如何切割目的基因
1. 用 切割目的基因
29、(1)逆轉錄酶(2)III 鹼基互補配對人的基因與大腸桿菌DNA雙螺旋結構相同(3)CaCl2 細胞壁(4)普通質粒或重組質粒 抗氨苄青黴素和四環素抗性重組質粒(5)共用一套密碼子 生長激素基因——>mRNA——>生長激素 (1)目的基因的獲取途徑有三條,從圖中可以明顯地看出,是通過逆轉錄法這一人工合成法來獲取的,過程①是逆轉錄過程,需要逆轉錄酶。 (2)由圖看以看出在質粒中基因Ⅱ的位置插入的目的基因,只能用限制性核酸內切酶Ⅰ切割質粒,如果使用限制性核酸內切酶Ⅱ切割的話,在質粒的基因Ⅰ的位置也會切割;目的基因的兩端都要切割,所以應該選擇限制性核酸內切酶Ⅱ切割。用限制酶切割目的基因和運載體後形成的黏性末端通過鹼基互補配對原則進行連接。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組,原因是人的基因與大腸桿菌DNA雙螺旋結構相同。人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組,說明人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結構相同,即基因是生物遺傳物質的結構和功能的基本單位。根據限制酶的專一性特點,可知在構建基因表達載體過程中,應用限制酶Ⅰ切割質粒,用限制酶Ⅱ酶切割目的基因。 (3)將目的基因導入到細菌細胞中的方法是鈣離子處理法,使其細胞壁通透性增強,便於將目的基因形成的重組DNA分子進入。 (4)在氨苄青黴素的培養基上能形成菌落的,說明導入了普通質粒或重組質粒,再在含有四環素的培養基上培養,得到如圖b的結果(空圈表示與a對照無菌落的位置)。與圖b空圈相對應的圖a中的菌落表現型,形成菌落是含有抗氨苄青黴素和四環素抗性,不能形成菌落的是含有重組質粒的細菌。 (5)其目的基因能成功地在大腸桿菌中得以表達,則說明人和細菌等生物共用一套(遺傳)密碼子。其表達的過程是:人的生長激素基因,通過轉錄形成信使RNA;再通過翻譯,形成人的生長激素。其場所在細菌體內,所用的核苷酸和氨基酸等原料均來自於細菌體內。目的基因在受體細胞內表達原因是共用一套完全相同的密碼子,目的基因表達過程為生長激素基因——> mRNA——>生長激素。
2. 構建好的載體 怎麼把目的基因切掉 重做
一般構建載體時,會將目的基因和載體用相同的內切酶切出一定的序列,再用連接酶連接而成;所以想切掉目的基因很簡單,就是再用之前的內切酶進行切除就好了。
3. 兩種酶怎麼切割DNA請畫圖,還有目的基因的切割
這是高中生物選修階段的內容,DNA有鏈裝和環裝兩種,兩種酶的切割位點未知,目的回基因也不知道是答處於哪個位置,建議給出具體的題目來更好的解答。
如果要獲取目的基因,那兩種酶不能破壞他,然後用兩種酶可以防止自身環化
4. 限制酶是怎樣切目的基因的 得到一個目的基因是不要切兩下呢 過程說一下 最好能詳細點。。。謝謝啦~
嗯,在目的基因的兩端分別切一下。
你想像一下,要將一個圓環(或一條線)的一小段取下來,當然需要兩刀
5. 基因工程中,切割目的基因和載體
切割載體和含有目的基因的DNA片段後形成的黏性末端,只有存在互補序列才能連接形成重組DNA片段,欲獲得存在互補鹼基序列的黏性末端一般需使用同種限制酶切割.
故選:A.
6. 限制酶切割目的基因和載體用同一種酶,但是目的基因切兩個割下來 ,載體只切一刀,怎麼用同種酶
限制酶切割目的基因和載體用同一種酶,但是目的基因切兩個割下來 ,載體只切一刀,怎麼用同種酶???
分子生物學 生物化學 微生物 脫氧核糖核酸(DNA) 生
7. 限制性核酸內切酶如何切割目的基因(高懸賞)
限制性內切酶的作用機制太復雜了
不同的限制性內切酶作用方式都不一樣
根據維基百回科,可以分為答Type1、2、3、4等多種
不過大體來說,限制性內切酶都能夠特異性識別並結合核酸的特殊反向迴文序列(Inverted repeat palindromes ),然後催化斷裂核苷酸鏈
更多細節請參考http://en.wikipedia.org/wiki/Restriction_enzyme
8. 限制酶怎麼切割目的基因圖解
因為要獲得一個目的基因,需將此目的基因兩邊多餘的脫氧核苷酸切除掉,因此有兩個切口,又DNA分子是雙鏈的,所以有4個磷酸二酯鍵被切.
9. 基因工程中切割載體和含目的基因的DNA片段是需使用同種限制酶是為什麼是怎麼切割怎麼連的,能不能簡述
所用的同種限制酶是限制性內切酶,也叫做內切酶,至於具體用哪回個內切酶,要根據答你要切的序列進行分析,分析的軟體很多,比如OMIGA,MEGA,primer premier......
至於怎麼切割怎麼連,下面已經說的很清楚了,簡說,就是識別-切割-連接。
基因工程的主要步驟:
1.目的片段的分離與合成,獲得目的片段
2.目的片段與載體連接(載體有兩種,一種叫做克隆載體,為了大量獲得該片段,並對在片段在基因層面進行研究;另一種叫做表達載體,為了將目的片段翻譯成蛋白,對蛋白進行研究);
3.含有目的片段的載體導入宿主細胞內
4.對宿主進行檢測和篩選,主要檢測是否導入成功,和導入的基因是否你所要的;
10. 基因工程中 切割目的基因和載體所用的限制酶及切口必備的特點
在基因工程操來作中為了獲得源重組質粒,一般用相同的限制性內切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體,以露出相同的黏性末端,再用DNA連接酶連接形成重組質粒;也可以用不同的限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體,但露出的粘性末端相同,再用DNA連接酶連接.
故選:A.