限制酶切割哪裡

⑴ 限制性內切酶切什麼位置

3,5-磷酸二酯鍵

⑵ 限制酶切割的到底是哪個位置不要說是磷酸二酯鍵，我要具體的說明

圖中2的位置

⑶ 限制酶切割目的基因是在體外

載體原本是一個來環狀的源,要插入一條目標基因,就要把環狀載體切開,就用刀限制酶來切.但是如果載體和目標基因都有這個限制酶對應的切點,那麼限制酶不僅會把載體切開成條帶狀,也會把目標基因切成兩段.把載體切成條帶狀正是我們需要的,但是把目標基因切成兩段是不對的,這樣會使目標基因失去原有的表達作用.

⑷ 限制性核酸內切酶切割的原理和方法是什麼

限制性核酸內切酶切割的原理：限制性核酸內切酶作用於雙鏈DNA的磷酸二酯回鍵，這種酶能識別特定的鹼基答序列，並且有特定的切割位點。

不同的限制性內切酶作用方式都不一樣。不過大體來說，限制性內切酶都能夠特異性識別並結合核酸的特殊反向迴文序列（Inverted repeat palindromes ），然後催化斷裂核苷酸鏈。

⑸ 要怎麼樣限制酶才能完全切割

1.限制性內切酶，有2到3個單位就可以了，檢查一下酶的質量，把酶切溫度提高到37度試試，如果內手中有別的容適合的限制性內切酶，可以做一下對照
2.溶在雙蒸水裡，如果你的TE 濃度不對（比如過濃），會影響酶切的。一般情況下，用於保存的質粒才用TE溶，酶切的還是用水好。再就是最好用試劑盒提，自己配的試劑不定什麼地方有問題呢，如果離心管和槍頭是國產的，最好用蒸餾水洗過烘乾再用

⑹ 限制酶怎麼切割目的基因圖解

因為要獲得一個目的基因,需將此目的基因兩邊多餘的脫氧核苷酸切除掉,因此有兩個切口,又DNA分子是雙鏈的,所以有4個磷酸二酯鍵被切.

⑺ 限制酶還能切割RNA嗎

不能。限制酶又稱限制性核酸內切酶，專一對DNA起作用。
限制性核酸內切回酶是可以識別特定的核苷酸序答列，並在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶，簡稱限制酶。根據限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。Ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性內切酶同時具有修飾及認知切割的作用。

⑻ 3．下表為5種限制性核酸內切酶（ 以下簡稱「限制酶」）的識別序列和切割位點（箭頭位置），

應該選D

C的答案比較難理解，大家都知道不同的酶產生的粘性末端可以相同，所以D的答案很容易理解，如BgI II、BamH I兩種限制酶。但也有些酶比較特殊，同種酶切出來的粘性末端是不一樣的，如BbvC

根據限制酶切割的特點，可將它們分為兩大類：一類是切割部位無特異性的；另一類是可特異性地識別核苷酸序列。這種能被特異性識別的切割部位都具有迴文序列，也就是在切割部位，一條鏈正向讀的鹼基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。

有一些限制酶的識別序列不是對稱的，如 AccBSⅠ 和BssSⅠ
AccBSⅠ CCG↓CTC BssSⅠ C↓TCGTG
GGC↑GAG GAGCA↑C
有一些限制酶可識別多種序列，如 AccⅠ 識別的序列是 GT↓MKAC ，也就是說可識別 4種序列，其中兩種是對稱的，另兩種是非對稱的。
有一些限制酶識別的序列呈間斷對稱，對稱序列之間含有若干個任意鹼基。如AlwNⅠ 和DdeⅠ，它們的識別序列如下。
AlwNⅠ CAGNNNC↓TG DdeⅠ C↓TNAG
GT↑CNNNGAC GANT↑C

限制酶在特定切割部位進行切割時，按照切割的方式，又可以分為錯位切和平切兩種。
（1）識別位點為迴文對稱結構的序列經限制酶切割後，產生的末端為匹配粘端，亦即粘性末端，這樣形成的兩個末端是相同的，也是互補的。
（2）平末端在迴文對稱軸上同時切割 DNA 的兩條鏈，則產生平末端
（3）非對稱突出端
許多限制酶切割 DNA 產生非對稱突出端。當識別序列為非對稱序列時，切割的DNA 產物的末端是不同的，如 BbvCⅠ，它的識別切割位點如下。
-CC↓TCAGC- 產生的粘性末端為 -CC 和 TCCAGC-
-GGAGT↑CG- -GGAGT CG-
有些限制酶識別簡並序列，其識別的序列中有幾種是非對稱的。如AccⅠ，它的識別切割位點如下，其中GTAGAC和 GTCTAC 為非對稱。
GT↓AT/CGAC
CATA/GC↑TG

⑼ 為什麼用限制酶切割目的基因時候需要使用兩種以上不同的限制酶進行切割

為了防止目的基抄因和運載體自身環化。為保證目的基因正序插入運載體，防止反向連接。

限制性核酸內切酶是可以識別並附著特定的脫氧核苷酸序列，並對每條鏈中特定部位的兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶。

(9)限制酶切割哪裡擴展閱讀：

限製作用實際就是限制酶降解外源DNA ，維護宿主遺傳穩定的保護機制。甲基化是常見的修飾作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保護。通過甲基化作用達到識別自身遺傳物質和外來遺傳物質的目的。

與第一型限制酶類似，同時具有修飾及識別切割的作用。可識別短的不對稱序列，切割位與識別序列約距24-26個鹼基對。

為有效的切割DNA，必須同時考慮DNA甲基化和限制酶對該類型甲基化的敏感性。另外，大部分商業限制酶如今專門用於切割甲基化DNA。

⑽ 什麼叫限制酶切割位點

基因工程中的構建基因表達載體需用到限制酶和DNA連接酶，限制酶會內識別限制酶切容割位點(即某個DNA序列，如AACC--TTGG，當然，不同的限制酶作用位點不一)，限制酶能將磷酸二酯鍵切斷，不是隨便切斷，而是特定的。