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酶如何切割dna

發布時間: 2021-01-27 22:27:44

A. 兩種酶怎麼切割DNA請畫圖,還有目的基因的切割

這是高中生物選修階段的內容,DNA有鏈裝和環裝兩種,兩種酶的切割位點未知,目的回基因也不知道是答處於哪個位置,建議給出具體的題目來更好的解答。
如果要獲取目的基因,那兩種酶不能破壞他,然後用兩種酶可以防止自身環化

B. 不同限制酶切割dna的位點不同

AC、一種限制酶能識別一種特定的核苷酸序列,並能在特殊位點切割DNA分子,專A正確,C錯誤,D正確;
B、同一種限屬制酶切割不同的DNA產生的黏性末端相同,能夠很好地進行鹼基配對,B正確.
故選:C.

C. 兩種不同的DNA限制酶切割為何會形成相同的黏性末端如何判斷兩種限制酶切割是否會形成相同的黏性末端

識別的位點相同就可以了,而產生相同的鹼基序列就是判斷是否能形成粘性末端的依據

D. 這限制酶切割轉到DNA雙螺旋結構上是怎麼切割的

其實DNA雙螺旋結構只是具體的表現形體,我們在細化時首先要重點關注一專下限制酶的切割遠離屬,它是有特異性識別位點,然後水解鹼基之間的3',5'磷酸二酯鍵。
我們平時所說的序列一般都是對核苷酸的簡稱,比如ATGC,從圖片上來看,也就是鹼基配對的部位,可以理解為限制酶的識別位點,水解之後再水解鹼基互補中的氫鍵。

E. 限制性內切酶如何切割,外源DNA怎麼連上去

這一過程需藉助兩種酶:限制性核酸內切酶和DNA連接酶。

限制性核酸內專切酶是可以識別特定的脫屬氧核苷酸序列,並在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶,簡稱限制酶。

DNA連接酶利用NAD或ATP中的能量催化兩個核酸鏈之間形成磷酸二酯鍵。反應過程可分三步:

(1)NAD+或ATP將其腺苷醯基轉移到DNA連接酶的一個賴氨酸殘基的ε─氨基上形成共價的酶-腺苷酸中間物,同時釋放出煙醯胺單核苷酸(NMN)或焦磷酸。

(2)將酶-腺苷酸中間物上的腺苷醯基再轉移到DNA的5'-磷酸基端,形成一個焦磷醯衍生物,即DNA-腺苷酸;

(3)這個被激活的5'-磷醯基端可以和DNA的3'-OH端反應合成磷酸二酯鍵,同時釋放出AMP。

F. 可以通過什麼辦法防止限制性內切核酸酶切割後的dna自身環化

Ⅰ(1)質粒分子經SmaⅠ切割前,為環狀DNA,無游離磷酸基團;切割後,會斷裂2個脫氧核苷酸(CG)之間的磷酸二酯鍵,露出2個游離磷酸基團.(2)插入的SmaⅠ酶切位點越多,鹼基對CG越多,氫鍵越多,故質粒的熱穩定性越高.(3)只使用EcoRI,質粒、外源DNA自身都只含有1對互補黏性末端,自身會發生連接成為環狀DNA,不利目的基因導入.故使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA,各自會有不同黏性末端,能防止自身環化.Ⅱ.原核生物(如大腸桿菌)是基因工程中較理想的受體細胞,具有一些其他生物沒有的特點:①繁殖快,能大量快速復制DNA;②多為單細胞,結構簡單,容易操作;③遺傳物質相對較少,不易對目的基因干擾.大腸桿菌細胞最常用的轉化方法是:首先用Ca2+處理細胞,使之成為感受態細胞,然後完成轉化.Ⅲ.植物基因工程中將目的基因導入受體細胞最常用的方法是農桿菌轉化法.且一般將目的基因插入Ti質粒的T-DNA中形成重組Ti質粒,這樣可將目的基因整合到受體細胞的染色體上.移植入的目的基因為單個,故轉基因植株一般為雜合子.要避免基因污染,一般需將目的基因導入植物細胞的細胞質(線粒體、葉綠體),不會隨著花粉進行基因污染.故答案為:Ⅰ.(1)0 2 (2)高 (3)質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化Ⅱ.③遺傳物質相對較少 Ca2+ 感受態Ⅲ.農桿菌轉化法 T-DNA 雜合 細胞質(線粒體、葉綠體)

G. 限制酶怎麼切割目的基因圖解

因為要獲得一個目的基因,需將此目的基因兩邊多餘的脫氧核苷酸切除掉,因此有兩個切口,又DNA分子是雙鏈的,所以有4個磷酸二酯鍵被切.

H. dna分子經限制酶切割產生的dna片段末端通常用的兩種方式是哪兩種

簡單來說,限制性內切酶識別DNA序列中的迴文序列。有些酶的切割位點在迴文版的一側(如EcoR I、BamH I、Hind等)權,因而可形成粘性末端,另一些Ⅱ類酶如Alu I、BsuR I、Bal I、Hal Ⅲ、HPa I、Sma I等,切割位點在迴文序列中間,形成平整末端。

I. 為什麼原核生物的限制酶不切割自己的DNA

在長期的進化過程中原核生物形成了一套完善的防禦機制,以保持自身遺專傳的相對穩定性.當外源DNA侵入後屬,限制酶就將其切割掉,使外源DNA不能發揮遺傳效應,而且限制酶往往與一種甲基化酶同時成對存在,它們具有相同的底物專一性,具有識別相同鹼基序列能力.甲基化酶的甲基供體為S-腺苷甲硫氨酸,甲基受體為DNA上的腺嘌呤與胞嘧啶.當限制酶作用位點上的某一些鹼基被甲基化修飾後,限制酶就不能再降解這種DNA了.這樣在含有某種限制酶的原核生物的細胞中,其DNA分子中不具備這種限制酶的識別切割序列,或者通過甲基化酶將甲基轉移到所識別序列的鹼基上,使限制酶不能將其切開.所以限制酶只降解外源入侵的異種DNA,而不分解自身DNA

J. 限制酶怎樣切割DNA序列主要是在DNA的哪部分分割切割時遵循哪些守則

限制酶會識別特定的DNA序列,沒有特定的哪一部分,就是哪有它要識別的序列它就會切哪。

而粘性末端不是限制酶切的地方,而是限制酶切完之後的DNA的埠叫做粘性末端。

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