基因工程質粒怎麼被切割
㈠ 基因工程中被同一限制酶切割的目的基因和質粒片段是相同的嗎如果是
限制性內切酶是識別特定的核苷酸序列、然後對這段序列進行切割的一種酶。不同內的限制性內切酶識別的核苷容酸序列不同,切的方式也不同。
比如說 Alu I這種限制性內切酶識別AGCT的雙鏈,然後在G和C之間進行切割,位點如下:
5'-A G^C T-3'
3'-T C^G A-5'
切割之後的形成一個平末端。
而Hind Ⅲ這種限制性內切酶識別位點是:AAGCTT,
切割後的片段具有黏性末端
所以說,在基因工程中被同一限制性內切酶酶切割,只需要都包含有這個限制性內切酶的識別位點就行了,其它的序列可以是不同的。
㈡ 基因工程中用限制酶切割質粒,是切斷而已,沒有切除掉一小片段吧
限制酶切割質抄粒的原理是根據限制酶的作用位點決定的
1.單一的限制性內切酶來說,它只有一個識別位點,作用於質粒時,在識別位點將質粒切斷,形成線性化質粒,此時只是切斷,並沒有丟失序列,通過瓊脂糖凝膠電泳可以非常明顯的看到剪切前後的區別。
2.當然還有個別的能識別多個位點的限制酶,或者多個限制酶共同作用,這時切斷的序列就變成了兩段獨立的序列,通過瓊脂糖凝膠很容易就看到一大一下兩端序列。
㈢ 請問基因工程里限制酶切質粒需要切幾次
在高中生物里只用一種限制酶的情況下,目的基因切兩次,質粒切一次。
實際操作中,內由於容種種條件限制,往往需要用到兩種限制酶識別兩種切割位點,所以是各切兩次。不管怎麼切,保證切完後目的基因兩端的識別位點和質粒切口兩端相同即可。
㈣ 高二生物 基因工程 目的基因和質粒是否要用同一限制酶進行切割
目的基因和質粒要[同時]用同一種限制性核酸內切酶切割,不然就沒法連了專。但最好用屬不同的限制酶切兩端(切目的基因是不是應該切兩下么),防止載體自連或目的基因自連。
啊啊,這道題。這題是這樣的,你仔細看一下質粒,若用酶2切,那質粒兩處酶切位點都要斷,所以質粒只能用酶1切,保證其只有一個缺口。然後目的基因則只能用酶2切,這樣兩端才都能切下來。(若用酶1的話目的基因右端是切不了的)
希望能幫到你。
㈤ 基因工程中,為什麼切質粒和切目的基因要
基因工程中,為什麼切質粒和切目的基因要
使用方法同種酶,為了使質粒和目的基因的切口形成相同(或者說互補也可以)的鹼基序列,才能讓目的基因嵌入質粒中
㈥ 生物的基因工程中,目的基因為什麼有兩個切口,而質粒只有一個切口
目的基因有兩個切口是為了把目的基因切下來,而質粒上一個切口是為了切出一個讓目的基因插入的點,不過,一般情況下質粒和目的基因是同時用兩個不同的限制酶切割,所以一般都是兩個切口
㈦ 基因工程中切割載體和含目的基因的DNA片段是需使用同種限制酶是為什麼是怎麼切割怎麼連的,能不能簡述
所用的同種限制酶是限制性內切酶,也叫做內切酶,至於具體用哪回個內切酶,要根據答你要切的序列進行分析,分析的軟體很多,比如OMIGA,MEGA,primer premier......
至於怎麼切割怎麼連,下面已經說的很清楚了,簡說,就是識別-切割-連接。
基因工程的主要步驟:
1.目的片段的分離與合成,獲得目的片段
2.目的片段與載體連接(載體有兩種,一種叫做克隆載體,為了大量獲得該片段,並對在片段在基因層面進行研究;另一種叫做表達載體,為了將目的片段翻譯成蛋白,對蛋白進行研究);
3.含有目的片段的載體導入宿主細胞內
4.對宿主進行檢測和篩選,主要檢測是否導入成功,和導入的基因是否你所要的;
㈧ 質粒被切下來的DNA片段去哪了
質粒上被切下來的DNA片段段會在溶液中游離著,因為切除掉的DNA片段過於短,在膠回收的時候也容易丟失。但是,如果載體做過去磷酸化處理,那麼在後續目的基因和載體的連接反應中就完全不會有影響的。
打字不易,望採納。
㈨ 「基因工程中切割目的基因和質粒的限制酶可以不同.」為什麼
不同的酶不一定具有不同的黏性末端,只要是有相同的切割末端就可以用來切割目的基因和質粒的限制酶
㈩ 基因工程操作中,用的三個限制酶(一個切割質粒,兩個切割目的基因)都可以不同嗎,也就是可以是三種嗎
標題的理解不來對。
限制自酶切基因的目的是為了露出相匹配的單鏈末端,即切割後目的基因的一個末端會和質粒的末端相匹配,就可以連起來,而為了獲得相匹配的末端則需要同一種限制酶。
所以,如果用一個限制酶切質粒的話,目的基因的兩端都要和質粒末端相匹配,切目的基因的限制酶也是那一個,就是一種限制酶。
如果用兩個限制酶切質粒的話,目的片段的兩端分別是2種相匹配的,需要用2種限制酶切。就是總共2種限制酶。不存在標題的情況。