用不同的限制酶切割的目的是什麼
Ⅰ 為什麼可以用不同的限制酶來切目的基因和載體
為什麼可以用不同的限制酶來切目的基因和載體？
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我們首先要明白酶切的目的是什麼回！其實就是把質粒切答開一個缺口，好讓目的基因進入！
而採用不同限制酶的原因是：載體上可用到的位點較少，確定載體需要的位點之後，再觀察目的基因，但是載體上可用的酶可能在目的基因內部有酶切位點。
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請採納~
Ⅱ 為何通常用兩種限制酶同時切割目的基因和運載體
兩種不同復的限制性內切酶制識別並切割的序列是不同的,也就是兩種酶分別切割了基因和載體時,產生了兩個切口,這兩個切口不是粘性末端,不能互補配對,所以不可能連接在一起,如果用一種酶來切那麼這樣基因中或者是載體上就會有相同的粘性末端,這樣基因本身除了切下來的那段之外,剩下的部分在連接酶作用下相同的粘性末端就會配對連接,同樣載體也會繼續連接成環,基因和載體連在一一起也有,而且首尾的順序也有兩種,連接體系跑電泳結果會有4個條帶,至少是4種,而且就算那個連接後的片段大小符合你要求的那段純化後也有一部分是不能表達的.哪四種就不用寫了,你肯定知道的,不能表達的那部分就是順序不對的,這就是同種酶切連接的缺陷性.
Ⅲ 高中生物 為何用相同限制酶切割目的基因和質粒
這樣可以使切割後的目的基因與質粒連接上
Ⅳ 2不同的限制酶切割目的基因和質粒有什麼優點
一般會使用相同的兩個限制性核酸內切酶對目的基因和載體進行切割，使它們產版生相同的末端，權可以在T4 dna 連接酶的作用下，進行連接反應，構建重組質粒。
一般在構建重組質粒的時候都會先用大腸桿菌做克隆，因為大腸桿菌的步驟簡單，培養方便，提取質粒方便。
望採納
Ⅳ 為什麼要兩種酶才能切割基因（兩端要不同的限制酶），不能是同一種嗎
切割目的基因時同種序列當然可以用同種限制酶切割；但有時也用不同種的限制性酶專割。屬
用不同限制酶切割的目的是：保證目的基因和質粒（運載體）的准確連接，避免無效連接（如：目的基因—目的基因連接物、質粒自身環化等）過多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理：
雖然一種限制酶只能識別一種特定的氨基酸序列，但兩種限制酶識別的序列可以相包含，例：酶A識別GGATCC序列，酶B識別GATC序列，則GGATCC序列就可以被兩種限制酶切割。哪裡不明白請追問，滿意請採納，希望對你有幫助~
Ⅵ 為什麼用限制酶切割目的基因時候需要使用兩種以上不同的限制酶進行切割
為了防止目的基抄因和運載體自身環化。為保證目的基因正序插入運載體，防止反向連接。
限制性核酸內切酶是可以識別並附著特定的脫氧核苷酸序列，並對每條鏈中特定部位的兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶。
(6)用不同的限制酶切割的目的是什麼擴展閱讀：
限製作用實際就是限制酶降解外源DNA ，維護宿主遺傳穩定的保護機制。甲基化是常見的修飾作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保護。通過甲基化作用達到識別自身遺傳物質和外來遺傳物質的目的。
與第一型限制酶類似，同時具有修飾及識別切割的作用。可識別短的不對稱序列，切割位與識別序列約距24-26個鹼基對。
為有效的切割DNA，必須同時考慮DNA甲基化和限制酶對該類型甲基化的敏感性。另外，大部分商業限制酶如今專門用於切割甲基化DNA。
Ⅶ 在什麼情況下，切割目的基因和載體時使用不同種限制酶
如果要獲得互補的缺口用於連接，而載體或目標片段上又有多個酶切位點，如果有同尾酶的話就可以使用。一般情況下切割載體和目的基因需要使用相同的酶，偶爾也會使用不同的同尾酶。
Ⅷ 為什麼用兩種限制酶切有兩種不同的目的基因（產生兩種
為什麼用兩復種限制酶切有兩種不同的目制的基因
用A、B兩種酶切出目的基因來，可以防止自環。然後再用A、B酶去切質粒，也可防自環，且得到與目的基因互補的黏性末端，才能連接目的基因。所以，既要用兩種不同酶切，還要保證質粒和目的基因一樣的兩種酶。兩種不同的限制性內切酶識別並切割的序列是不同的,也就是兩種酶分別切割了基因和載體時,產生了兩個切口,這兩個切口不是粘性末端,不能互補配對,所以不可能連接在一起,如果用一種酶來切那麼這樣基因中或者是載體上就會有相同的粘性末端,這樣基因本身除了切下來的那段之外,剩下的部分在連接酶作用下相同的粘性末端就會配對連接,同樣載體也會繼續連接成環,基因和載體連在一一起也有,而且首尾的順序也有兩種,連接體系跑電泳結果會有4個條帶,至少是4種,而且就算那個連接後的片段大小符合你要求的那段純化後也有一部分是不能表達的.哪四種就不用寫了,你肯定知道的,不能表達的那部分就是順序不對的,這就是同種酶切連接的缺陷性.
Ⅸ 為什麼用兩種限制酶切有兩種不同的目的基因（產生兩種粘性末端）
不同的限制酶切割的序列不同，因此如果用一種切割會造成兩種目的基因粘性末端相同，無法區分開來。再者，限制酶還不能破壞標記基因。