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用一定的什麼切割質粒

發布時間: 2021-02-17 00:25:30

『壹』 切割質粒和含目的基因的外源DNA必須用同一種限制酶,這句話對嗎

不對,因為太絕對!一般情況下是用同一種限制性內切酶,這樣暴露同樣的黏性末端,然後用DNA連接酶進行連接.但是也存在不同的限制性內切酶切割形成相同的黏性末端.

『貳』 在基因表達構建載體中什麼切割質粒什麼切割目的基因,為什麼

質粒是一個閉合的DNA圓圈,你得先切開它,把它切成一條線;然後你再從一長串專DNA上切下你要的目的片段,屬用連接酶像膠水一樣,吧質粒的兩端和目的片段的兩端連接起來——又成一個圓圈了,但是這次這個DNA圓圈已經含有你要的片段了。

由於載體質粒只有圓圈狀才有活性,才有用,所以你必須這么做。。。

『叄』 在基因表達構建載體中什麼切割質粒什麼切割目的基因,為什麼

質粒是一個閉合的抄DNA圓圈襲,你得先切開它,把它切成一條線;然後你再從一長串DNA上切下你要的目的片段,用連接酶像膠水一樣,吧質粒的兩端和目的片段的兩端連接起來——又成一個圓圈了,但是這次這個DNA圓圈已經含有你要的片段了.
由於載體質粒只有圓圈狀才有活性,才有用,所以你必須這么做.

『肆』 切割質粒的酶是什麼

質粒中有兩個抗性基因,一個是四環素抗性基因和氨卞青黴素抗性基因,如果用酶1來切內會破壞兩容個抗性基因,同時把質粒切成兩個片段,所以只能選用酶2,切開一個切口,便於目的基因的插入。同理,目的基因需要用酶1,左右各形成一個切口,這樣才能切下一個目的基因。

『伍』 中什麼切割質粒什麼切割目的基因,為什

降低了環化可能。
如果切割位點為A-B-B之流,
那仍舊可能自發環化。
但位點由我們選擇,
可以規避以上情況。

『陸』 剪切目的基因所用的限制酶與切割質粒所用限制酶一定要相同嗎

一定要相同.
只有用同一種限制酶剪切目的基因和切割質粒,才能暴露相同的黏性末端或平末端,便於DNA連接酶的拼接

『柒』 最好用哪種酶切割質粒,用哪種酶切割目的基因所在DNA

兩種酶同時處理 這樣不會出現三種產物 不會環化 容易得到產物 避免篩選與檢測

『捌』 用兩種限制酶去切割質粒,質粒就被切割成2段了,質粒不就被破壞了嗎 最好用圖說明!

只要目的基因同樣用這兩種限制酶切割,再用DNA連接酶連接起來,形成重組質粒就好了,不會被破壞.

『玖』 用來切割質粒和目的基因的酶是否必須為同一種酶為什麼

用來切割質粒和目的基因的酶是否必須為同一種酶?為什麼
這個是不一定的。要專看具體題目,由屬於DNA連接酶連接的黏性末端互補,所以只要兩種酶產生的黏性末端互補(相同),所以再用DNA連接酶就可以(PS:雖然兩種酶識別序列不一樣,但是可能產生互補的黏性末端)。你會見到這樣的題目的

『拾』 基因工程操作中,用的三個限制酶(一個切割質粒,兩個切割目的基因)都可以不同嗎,也就是可以是三種嗎

標題的理解不來對。
限制自酶切基因的目的是為了露出相匹配的單鏈末端,即切割後目的基因的一個末端會和質粒的末端相匹配,就可以連起來,而為了獲得相匹配的末端則需要同一種限制酶。
所以,如果用一個限制酶切質粒的話,目的基因的兩端都要和質粒末端相匹配,切目的基因的限制酶也是那一個,就是一種限制酶。
如果用兩個限制酶切質粒的話,目的片段的兩端分別是2種相匹配的,需要用2種限制酶切。就是總共2種限制酶。不存在標題的情況。

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