用定氮儀器怎麼來測量蛋白

⑴ 用Foss全自動凱式定氮儀測蛋白，從顯示屏上記錄的數據，怎麼樣進行數據處理呢，是有什麼公式么謝謝了

先做空白測定，空白數值穩定之後，選擇選擇模式2（加鹼蒸餾），選擇蛋白質模式，輸入稱樣的質量就可以了。如果是想要更改那個數據結果的話，定氮儀上是不能做的。

⑵ 求花生粕和豆粕用定氮儀測定粗蛋白含量的方法

凱氏定氮法

用於測定有機物的含氮量,若蛋白質的含氮量已知時，則可用此法測定樣品中蛋白質的含量。當蛋白質與濃硫酸共熱時，其中的碳、氫兩元素被氧化成二氧化碳和水，而氮則轉變成氨，並進一步與硫酸作用生成硫酸銨。此過程通常稱為「消化」。但是，這個反應進行得比較緩慢，通常需要加入硫酸鉀或硫酸鈉以提高反應液的沸點，並加入硫酸銅作為催化劑，以促進反應的進行。消化完成後，在凱氏定氮儀中加入濃鹼，可使消化液中的硫酸銨分解，游離出氨，藉助水蒸汽蒸餾法，將產生的氨蒸餾到一定量、一定濃度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨後，氨與溶液中氫離子結合，使溶液中的氫離子濃度降低，指示劑顏色改變，然後用標准無機鹽酸滴定，直至恢復溶液中原來的氫離子濃度為止。根據所用標准鹽酸的量可計算出待測物中的總氮量。蛋白質的含氮量為16%，即1克蛋白質中的氮相當於6.25克蛋白質，用凱氏定氮法測出的含氮量乘以6.25,即得樣品中蛋白質的含量。

1實驗材料1.1器材1.2試劑2實驗步驟

實驗材料

器材

微量凱氏定氮儀1套；

50ml凱氏燒瓶4個；

移液管；錐形瓶；

試管；

小玻璃珠

試劑

濃硫酸；

30％氫氧化鈉溶液；

2％硼酸溶液；

標准鹽酸溶液(0.01mol／L)。

粉末硫酸鉀—硫酸銅混合物：K2SO4與CuSO4·5H2O以3：1配比研磨混合。

混合指示劑(田氏指示劑)：由50ml0.1％甲烯藍乙醇溶液與200ml0.1％甲基紅乙醇溶液混合配成，貯於棕色瓶中備用。

樣品溶液：配製3mg/ml的牛血清白蛋白溶液作為樣品。

實驗步驟

安裝凱氏定氮儀。

消化：取4個50ml凱氏燒瓶並標號,各加1顆玻璃珠，在1號及2號瓶中各加樣品1ml，催化劑(K2SO4-CuSO4·5H2O)200mg，濃硫酸5ml。注意加樣品時應直接送入瓶底，而不要沾在瓶口和瓶頸上。在3號及4號瓶中各加1ml蒸餾水和與1、2號瓶相同量的催化劑和濃硫酸，作為對照。在通風櫥內進行消化。在消化開始時應控制火力，不要使液體沖到瓶頸。待硫酸開始分解並放出SO2白煙後，適當加強火力，繼續消化，直至消化液呈透明淡綠色為止。撤掉火力，冷卻至室溫。

蒸餾：

蒸餾器的洗滌：用水洗滌干凈微量凱氏定氮儀，在蒸汽發生器中加入用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑，用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鍾後，在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶，繼續蒸汽洗滌2分鍾，觀察錐形瓶內的溶液是否變色，如不變色則證明蒸餾裝置內部已洗滌干凈。移走錐形瓶，停止加熱，打開夾子。

蒸餾：取下棒狀玻塞，用吸管吸取消化液，細心地插到反應室小玻璃杯的下方，塞緊棒狀玻塞。將一個含有硼酸和指示劑的錐形瓶放在冷凝器下方，使冷凝器下端浸沒在液體內。取30％的氫氧化鈉溶液10ml放入小玻璃杯中，輕提棒狀玻璃塞使之流入反應室(為了防止冷凝管倒吸，液體流入反應室必須緩慢)。尚未完全流入時，將玻璃塞蓋緊，向玻璃杯中加入蒸餾水約5ml。再輕提玻璃塞，使一半蒸餾水慢慢流入反應室，一半留在玻璃杯中作水封。加熱水蒸汽發生器，沸騰後夾緊夾子，開始蒸餾。氨氣進入錐形瓶，瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。變色時起記時，再蒸餾5分鍾。移動錐形瓶，使硼酸液面離開冷凝管約1厘米，並用少量蒸餾水洗滌冷凝管口外面，繼續蒸餾1分鍾，移開錐形瓶，用表面皿覆蓋錐形瓶。蒸餾完畢後，須將反應室洗滌干凈，再繼續下一個蒸餾操作。待樣品和對照均蒸餾完畢後，同時進行滴定。

滴定：用0.01mol／L的標准鹽酸溶液滴定各錐形瓶中收集的氨量，硼酸指示劑溶液由綠色變淡紫色為滴定終點。

結果計算：

其中：

A為滴定樣品用去的鹽酸溶液平均ml數；

B為滴定對照液用去的鹽酸溶液平均ml數；

C為所取樣品溶液的ml數。

現在的公司有現成的儀器可以使用，上面是教材中的原理，哈哈

可以參考下面的網址

⑶ 用凱氏定氮法能檢測出真蛋白質嗎如果能其測定方法具體步驟

凱氏定氮法測的是樣品中的有機氮含量，而除了蛋白質中的氮是有機氮外專，還有很多有屬機物中的氮也是以氨基（-NH3）、亞氨基（-NH-）等有機氮形式存在的，因此只有在已知被測物由蛋白質組成的情況下，才能使用凱氏定氮法來定量蛋白質含氮量。具體測定方法網上很多，在這里不贅述。

⑷ 如何測定蛋白質中的氮元素含量

這是最經典的方法了——微量凱氏法
一、原理

植物組織中的有機氮化物包括蛋白氮和非蛋白氮。非蛋白氮主要是氨基酸和醯胺，以及少量無機氮化物，是可溶於三氯乙酸溶液的小分子。可加入三氯乙酸，使其最終濃度為5％，將蛋白質沉澱出來，分別測定總氮、蛋白氮或非蛋白氮；通常只測定總氮或蛋白氮。將植物材料與濃硫酸共熱，硫酸分解為二氧化硫、水和原子態氧，並將有機物氧化分解成二氧化碳和水；而其中的氮轉變成氨，並進一步生成硫酸銨。為了加速有機物質的分解，在消化時通常加入多種催化劑，如硫酸銅、硫酸鉀和硒粉等。消化完成後，加入過量NaOH，將NH4+轉變成NH3，通過蒸餾把NH3導入過量的硼酸溶液中，再用標准鹽酸滴定，直到硼酸溶液恢復原來的氫離子濃度。滴定消耗的標准鹽酸摩爾數即為NH3的摩爾數，通過計算，可得出含氮量。
蛋白質是一類復雜的含氮化合物，每種蛋白質都有其恆定的含氮量，（約在14％～18％，平均約含氮16％）所以，可用蛋白氮的量乘以6.25（100／16＝6.25），算出蛋白質的含量。若以總氮含量乘以6.25，就是樣品的粗蛋白含量。試樣中若含有硝態氮時，首先要使硝態氮還原為銨態氮，可加入水楊酸和硫代硫酸鈉，使硝態氮與水楊酸在室溫下作用生成硝基水楊酸，再用硫代硫酸鈉粉使硝基水楊酸轉化為銨鹽。由於水楊酸與硫代硫酸鈉會消耗一部分硫酸，所以消化時的硫酸用量要酌情增加。

二、材料、儀器設備及試劑

（一）材料：各種乾燥、過篩（60～80目）的植物樣品

（二）儀器設備：1. 消化管；2. 微量凱氏定氮蒸餾裝置一套（圖17）；3. 三角燒瓶；4.微量滴定管；5. 量筒；6. 容量瓶；7. 燒杯；8. 移液管等。

三、實驗步驟

（一）樣品提取分離：准確稱取烘至恆重的樣品0.1000g～0.5000g（依樣品含氮量而定，含氮1～3mg宜），置10ml離心管中，加入5ml5％三氯乙酸，90℃水浴中浸提15min，不時攪拌，取出後用少量蒸餾水沖洗玻棒，待溶液冷卻後，4000rpm離心15min，上清液棄去。並用5％三氯乙酸洗沉澱2～3次，離心，棄去上清液，最後用蒸餾水將沉澱無損地洗入鋪有濾紙的漏鬥上，去掉濾液後，將沉澱和濾紙在50℃下烘乾，用於蛋白氮的測定。

（二）樣品的消化：取4支消化管編號。1號管直接放入稱好的材料用於測定總氮，2號管放入上述烘乾的濾紙和沉澱，用於蛋白氮的測定，3號管放入同樣濾紙一張、4號管不加任何樣品作為空白對照，注意將樣品放入消化管底部。向各消化管加濃硫酸5ml，混合催化劑0.3g～0.5g，將樣品浸泡數h或放置過夜後，在管口蓋一小漏斗，放在遠紅外消煮爐上加熱消化。開始時溫度可稍低，以防止內容物上升至管口。泡沫多時，可從小漏斗加入2～3滴無水乙醇。到管口出現白色霧狀物時，泡沫已不再產生；此時可逐漸升溫，使內容物達到微沸。直到消化液變為清澈透明為止。消化過程中，若在消化管上部發現有黑色顆粒時，應小心地轉動消化管，用消化液將它沖洗下來，以保證樣品消化完全。消化過程約需2～3h。

（三）定容消化完畢待溶液冷卻後，沿管壁仔細加入10ml左右無氨蒸餾水，以沖洗管壁，再將消化液小心轉入100ml容量瓶中。以無氨水少量多次沖洗消化管，洗滌液並入容量瓶。冷卻後用無氨水定容至刻度，混勻備用。

（四）蒸餾及滴定 以下幾步進行：
1.儀器的洗滌：先經一般洗滌後，還要用水蒸氣洗滌。可按下列方法進行蒸氣洗滌。先在蒸氣發生器中加入2／3體積的蒸餾水（事先加入幾滴濃硫酸，使其酸化，加入甲基紅指示劑，並加入少許沸石或毛細玻璃管以防止爆沸）。打開漏斗下的夾子，用電爐或酒精爐加熱至沸騰，使水蒸氣通入儀器的各個部分，以達到清洗的目的。在冷凝管下端放置一個三角瓶接收冷凝水。然後關緊漏斗下的夾子，繼續用蒸氣洗滌5min。沖洗完畢，夾緊蒸氣發生器與收集器之間的連接橡膠管，蒸餾瓶中的廢液由於減壓而倒吸進入收集器，打開收集器下端的活塞排除廢液。如此清洗2～3次，再在冷凝管下端換放一個盛有硼酸－指示劑混合液的三角瓶，使冷凝管下口完全浸沒在液面以下0.5cm處，蒸餾1～2min，觀察三瓶內的溶液是否變色。如不變色，表示蒸餾裝置內部已洗干凈。移去三角瓶，再蒸餾1～2min，用蒸餾水沖洗冷凝管下口，關閉電爐，儀器即可供測定樣品使用。

2.標准硫酸銨測定為了熟悉蒸餾和滴定的操作技術，並檢驗實驗的准確性，找出系統誤差，常用已知濃度的標准硫酸銨測試三次。在三角瓶中加入20ml硼酸－指示劑混合液，將此三角瓶承接在冷凝管下端，並使冷凝管的出口浸入溶液中。注意在加樣前務必打開收集器活塞，以免三角瓶內液體倒吸。准確吸取2ml硫酸銨標准溶液，加到漏斗中。

四、結果計算
樣品中總氮量（％）＝0.010×（V3—V0）×100×14/（W×1000×10）×100×氮的回收率
樣品中蛋白氮含量（％）＝0.0100×（V1－V2－V0）×100×14/（W×5×1000）×100×氮的回收率
回收率（％）＝0.0100×（V－V0）×14/（2.0×0.6×100）×100

⑸ 各位化驗大哥大姐。小弟需要一份測蛋白粉的方法。我用的儀器是華燁的定氮儀。

凱氏定氮法：因N元素占蛋白質含量的16%所以只要測出N的含量，然後乘以2.5就得到蛋白質的含量。版基本原理就是權N在NaOH存在下加熱生成NH4+，根據NH4+的含量（可以用酸滴定法）算出N，然後再算出蛋白質的含量。

⑹ KDN–102C定氮儀 怎麼使用 詳細點解說 我是小白 測蛋白

園內中心廣場以改革開放40周年為題，設有傳統菊藝扎作「九龍吐珠」等大型菊藝景點，回四答周圍繞以春夏秋冬對應的24節氣為主題的四組小欖傳統燈藝門樓。更有佔地800平方園內中心廣場以改革開放40周年為題，設有傳統菊藝扎作「九龍吐珠」等大型菊藝景點，四周圍繞以春夏秋冬對應的24節氣為主題的四組小欖傳統燈藝門樓。更有佔地800平方

⑺ 怎樣 用凱氏定氮儀 測豆奶粉中蛋白質含量

蛋白質測定的國標規定方法——凱氏定氮法介紹

【GB/T 5009.5—1985】
食品中蛋白質的測定方法

本標准適用於各類食品中蛋白質的測定。
1 原理
蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。
2 試劑
所有試劑均用不含氨的蒸餾水配製。
2.1 硫酸銅。
2.2 硫酸鉀。
2.3 硫酸。
2.4 2%硼酸溶液。
2.5 混合指示液：1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。
2.6 40%氫氧化鈉溶液。
2.7 0.05N硫酸標准溶液或0.05N鹽酸標准溶液。
3 儀器
定氮蒸餾裝置：如圖所示。
（圖略）
4 操作方法
4.1 樣品處理：精密稱取0.2～2.0g固體樣品或2～5g半固體樣品或吸取10～20ml液體樣品(約相當氮30～40mg)，移入乾燥的 100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀及20ml硫酸，稍搖勻後於瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支於有小孔的石棉網上。小心加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止後，加強火力，並保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明後，再繼續加熱0.5h。取下放冷，小心加20ml 水。放冷後，移入100ml容量瓶中，並用少量水洗定氮瓶，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。
4.2 按圖裝好定氮裝置，於水蒸氣發生瓶內裝水至約2/3處，加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，用調壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。
4.3 向接收瓶內加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示液1滴，並使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應室，並以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內，塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其緩緩流入反應室，立即將玻塞蓋緊，並加水於小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾。蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾5min。移動接受瓶，使冷凝管下端離開液面，再蒸餾1min。然後用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.05N硫酸或0.05N鹽酸標准溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按4.3操作。
4.4 計算

式中：X——樣品中蛋白質的含量，%；
V1——樣品消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；
V2——試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；
N——硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度；
0.014——1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數；
m——樣品的質量(體積)，g(ml)；
F——氮換算為蛋白質的系數。蛋白質中的氮含量一般為15～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.70，玉米、高粱為6.24，花生為5.46，米為5.95，大豆及其製品為5.71，肉與肉製品為6.25，大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83，芝麻、向日葵為 5.30。
附加說明：
本標准由全國衛生標准技術委員會食品衛生標准分委員會提出，由衛生部食品衛生監督檢驗所歸口。
本標准由衛生部食品衛生監督檢驗所負責起草。

⑻ 凱氏定氮儀測定蛋白質的方法確認怎麼做

最關鍵的是計算：

X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) *F*100%

X：樣品中蛋白質的百分含量專，g；

V1：樣品消耗硫酸或鹽酸屬標准液的體積，ml；

V2：試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准溶液的體積，ml；

N：硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度；

0.014：1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數；

m：樣品的質量（體積），g（ml）；

F：氮換算為蛋白質的系數。蛋白質中的氮含量一般為15～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.70，玉米、高粱為6.24，花生為5.46，米為5.95，大豆及其製品為5.71，肉與肉製品為6.25，大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83，芝麻、向日葵為 5.30。

⑼ 凱氏定氮儀可以測蛋白質含量嗎

可以。凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然後在鹼性條件下將銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣餾出並為過量的酸液吸收，再以標准鹼滴定，就可計算出樣品中的氮量。由於蛋白質含氮量比較恆定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定量方法。
凱氏定氮法首先將含氮有機物與濃硫酸共熱，經一系列的分解、碳化和氧化還原反應等復雜過程，最後有機氮轉變為無機氮硫酸銨，這一過程稱為有機物的消化。為了加速和完全有機物質的分解，縮短消化時間，在消化時通常加入硫酸鉀、硫酸銅、氧化汞、過氧化氫等試劑，加入硫酸鉀可以提高消化液的沸點而加快有機物分解，除硫酸鉀外，也可以加入硫酸鈉、氯化鉀等鹽類類提高沸點，但效果不如硫酸鉀。硫酸銅起催化劑的作用。凱氏定氮法中可用的催化劑種類很多，除硫酸銅外，還有氧化汞、汞、硒粉、鉬酸鈉等，但考慮到效果、價格及環境污染等多種因素，應用最廣泛的是硫酸銅。使用時常加入少量過氧化氫、次氯酸鉀等作為氧化劑以加速有機物氧化。消化完成後，將消化液轉入凱氏定氮儀反應室，加入過量的濃氫氧化鈉，將NH4+轉變成NH3，通過蒸餾把NH3驅入過量的硼酸溶液接受瓶內，硼酸接受氨後，形成四硼酸銨，然後用標准鹽酸滴定，直到硼酸溶液恢復原來的氫離子濃度。滴定消耗的標准鹽酸摩爾數即為NH3的摩爾數，通過計算即可得出總氮量。在滴定過程中，滴定終點採用甲基紅-次甲基藍混合指示劑顏色變化來判定。測定出的含氮量是樣品的總氮量，其中包括有機氮和無機氮。

⑽ 怎樣在不改邊凱氏定氮法儀器的前提下准確測量蛋白質氮含量

這個問題很奇怪啊。。。。什麼叫不改變凱氏定氮儀的前提下測量？你想內怎麼改變？容首先要有蒸餾水和鹼連著凱氏定氮儀吧？然後你把樣品消煮好之後放進去就行了，准備好硝酸吸收，最後用鹽酸滴定就行。對了，硝酸裡面加甲基紅和溴甲酚綠做指示劑