質粒測序用什麼儀器

⑴ 菌液測序和提質粒再測序有什麼區別

從本質上看兩者並無大的不同。所謂的菌液測序其實也是菌液中的質粒通過版PCR擴增後達權到一定的量後就可以和質粒一樣用於測序儀測序了。但兩者在操作上卻有很多不同，畢竟不同的菌株質粒含量不一致，尤其拷貝數較低的菌液，PCR擴增的成功率不高，那測序的成功率也會降低，而且測序的在效長度也較低。所以除非質粒比較小或拷貝高，可以直接用菌液測序外，一般還是提質粒測序較為穩妥。

⑵ 常用的基因測序儀器有哪些生命科學知識在什麼地方可以學習

在生物幫可以找到關於基因測序儀器的介紹，以實驗方法和實驗儀器的改進版為標志DNA測序技術迄今權經歷了三代的發展；常用的五種基因測序儀器ABI 3730XL、ABI SOLID 、Illumina GA、ROCH-454和HeliScope,在那裡有文檔會對儀器進行比較，介紹的比較詳細 有空可以去那兒（ YIQI.www.bio1000.com/ ）查看一下，在技術文檔中，搜一下就可以找到了。

⑶ 為什麼質粒和PCR產物需要拿去測序啊

質粒和PCR產物需要拿去測序有2個目的，一是驗證插入序列的DNA序列是否無誤。第二是看插入的方向和位置是否正確。如果做定量PCR用到質粒的話，一般是用來做標准曲線的。
聚合酶鏈式反應是一種用於放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行比對。這也是「微量證據」的威力之所在。由1983年美國Mullis首先提出設想，1985年由其發明了聚合酶鏈反應，即簡易DNA擴增法，意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年，PCR已發展到第三代技術。1973 年，台籍科學家錢嘉韻，發現了穩定的Taq DNA聚合酶，為PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。
PCR(聚合酶鏈式反應）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經常是60°C左右）時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合，再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。基於聚合酶製造的PCR儀實際就是一個溫控設備，能在變性溫度，復性溫度，延伸溫度之間很好地進行控制。

⑷ dna檢測用到了什麼儀器

測什麼？
一般檢測結果的醫院用的多是熒光定量pcr儀，還有親子鑒定，測序啊用的是測序儀。
測序儀又分為一代、二代和正在研究中的三代。

說多了你也不懂。

⑸ 高通量測序技術ngs用什麼儀器

「普通的基因測序」抄應該是指「常規DNA測序」吧，是用Sanger法（也就是雙脫氧法）進行測序的方法，目前非常普遍的是直接用ABI 3730xl 進行的自動測序，基本上可以做到600bp-800bp的讀長。
高通量測序的概念其實是一個相對的概念，在2000年的時候，3700、MegaBace等儀器上的測序也是高通量測序，是相對手工測序或者跑平板膠來說的。
不過到2005年以後，高通量測序就改指第二代測序（Next generation sequencing），454、Solexa(後改為Illumina）和SOLiD等第二代測序，比3730等第一代測序的通量提高了成千上萬倍，甚至上億倍，所以稱為高通量測序。
NGS的特點主要有：
1、通量高。一個RUN能產生500Mb-600Gb的數據量。
2、讀長相對較短。454(約400-500bp)，llumina（100-250bp），SOLiD（75-100）。
3、單位數據的成本非常低。現在很多項目測序的費用。已經非常低。生物信息分析成本變得更為重要了。

⑹ 為什麼送去測序的片段要通過菌液，而不是直接拿PCR去測序

由於測序的儀器敏感度等原因，每家測序的要求不一樣，收費也不一樣。
一般版來說，測序的樣本權可以是PCR產物，也可以是質粒。樓上說的有一定道理，但不是不能用PCR產物測序的理由。

要求你提供菌液，是因為他們的測序反應體系對質粒的溶液比較敏感，比如對EDTA，鹽溶液的濃度等，所以乾脆他們自己來提質粒。PCR產物也類似。他們不清楚你是如何做PCR的，也就不知道反應物當中有沒有會抑制測序的成分。

⑺ 構建基因組dna illumina測序文庫時可能用到哪些工具酶

在構建基因表抄達載體時要用到的工襲具酶有限制酶和DNA連接酶。
基因表達載體的構建（即目的基因與運載體結合）是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其構建目的是使目的基因能在受體細胞中穩定存在，並且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發揮作用。
過程：
首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現一個缺口，露出黏性末端。然後用同

一種限制酶切斷目的基因，使其產生相同的黏性末端（部分限制性內切酶可切割出平末端，擁有相同效果）。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處，首先鹼基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，鹼基之間形成氫鍵，再加入適量DNA連接酶，催化兩條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連接起來，形成一個重組DNA分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒DNA分子結合，形成重組DNA分子（也叫重組質粒）的。

⑻ 我把連到質粒上的序列拿到生物公司去測序，老是出問題。我想問一下，他們一般是用什麼方法測的

單測=單向測來序，你提供一種你的自PCR引物進行測序，可以使F或者R。
雙測=雙向測序，你提供你的F和R引物讓它雙向測序。這里雙向測序涉及兩次測序，需要兩個反應一次是F一次是R，所以叫做兩個反應。
當然你以後還會遇到一種叫做通用引物測序，這個是根據你的載體決定的，比如你想測LacZ啟動子後面的序列，你可以用LacZ的通用引物

⑼ 質粒載體在DNA測序上有何用途

在DNA樣品中的DNA序列分布勻稱,沒有復雜結構時,正常的單個測序反應能保證達到800Bases以上.但有一些DNA樣品專立體結屬構復雜（例如polyA/T/C/G,重復序列,GCrich等）,造成聚合酶延伸反應終止,測序信號突然減弱或消失,或者是測序結果出現套峰等現象.
上述這樣的情況,一般建議換用反向引物進行測序；或者是在結構序列之後設計合適的引物,反向覆蓋結構序列.dna測序過程，其實是pcr的過程，你只要有足夠的模板用於pcr反應就行，不一定要克隆到載體上。
當然，大多數都是克隆到載體上，因為你需要將待測dna遞交給測序公司，位於載體上的dna可以保存在細菌中，方便運輸，也方便測序公司進行擴增（培養菌，提質粒就行了），有時測序是需要重測的，一次不能測完，培養細菌擴增質粒是最簡單的方法。

⑽ 我的質粒拿去測序，為什麼正向測不出

反向測不需要正向引物，但它需要一個反向引物。其實測序也就是一個單向的回PCR反應，只是在反應體系中加答入了四種不同顏色染料（常用的是ET或BigDye）染過的ddNTP,當不同大小的片斷在毛細管膠上通過熒光掃描器後，電腦會記錄染料顏色，從而得出序列的。
正向測不通，可能是因為：
1、你的模板比較困難，比如GC含量局部比較高，形成發夾結構，或出現連續的G、C，也可能是連續的C、T。而生工一板要做384或96個反應，用的PCR條件是統一的，不可能兼顧到你的序列的特殊情況，因此你的序列PCR不出來
2、PCR純化試劑盒有問題，可以考慮換純化試劑盒。
3、測序時進樣太多或太少
解決方法：
1、你可以試試用載體上的通用引物進行測序
2、已經設計出來的序列上設計一段引物，進行walking