測雙熒光素酶的儀器有哪些

❶ 怎麼使用多功能酶標儀檢測雙熒光素酶報告基因

可以咨詢佳學基因的科研人員。佳學基因專注於基因檢測和基因解碼。

❷ 檢測熒光素酶報告基因發出熒光的都有什麼儀器 例如各有什麼優缺點之類的

Luminex,熒光分光光度儀,熒光凝膠成像儀,液閃儀 ,熒光酶標儀,熒光顯微鏡
都很貴.推薦熒光酶回標儀和熒光顯微鏡.
Luminex是液體晶元答測定,同時檢測30個目的蛋白,定量,靈敏.
熒光分光光度儀用途比較局限,不方便.
熒光凝膠成像儀的對象是凝膠
液閃儀和luminex很像,但是只能檢測一個蛋白或靶標
熒光酶標儀就是酶標儀,但是可以檢測熒光信號,同時可以測定至少96個樣品的單一靶標
熒光顯微鏡不能定量,但非常直觀,可以看到是那些細胞發光,以及發光的部位.而且可以同時看到1-3種熒光,價格比前者低些.

❸ 實驗室常見的儀器有哪些

以喜格規劃設計的實驗室一般都有超凈工作台、冰箱、電子天平、手提式高壓蒸汽滅回菌器、電熱恆答溫水浴鍋、電熱蒸餾水器、雙目生物顯微鏡、電熱恆溫培養箱、離心機、馬弗爐（高溫爐）、分光光度計、pH計、酶聯免疫檢測儀

❹ 檢測熒光素酶報告基因發出熒光的都有什麼儀器

成像的話一般熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡；定量的話一般就是流式細胞儀吧。

❺ 如何使用多功能酶標儀檢測雙熒光素酶

報告基因檢測被廣泛應用於研究基因表達及外部刺激下原核和真核細胞的反應。報告基因系統是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統。可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達。但是報告基因實驗中往往會受到各種實驗條件的影響，例如培養細胞的數目和活力的差別、細胞轉染和裂解的效率、以及加樣操作過程中引起的變異。Dual-Luciferase雙熒光素酶報告基因檢測系統中含有在同一細胞中同時表達的兩種熒光素酶。共轉染的「對照」報告基因會作為內對照，減小細胞活性和轉染效率對實驗的影響。因此雙報告系統減少了外部干擾，使得實驗數據更可信。Promega提供了一種先進的雙報告基因技術（Dual-reporter assays）,結合了螢火蟲熒光素酶測試和海腎熒光素酶測試，該技術同時使用兩個獨立的報告基因以提高實驗的准確性，Biotek synergy 系列微孔板檢測儀作為雙報告基因的檢測分析平台獲得了Promega DLR 認證。
在雙報告基因系統中，通常一個報告基因用於檢測特定實驗條件下待測物的反應，即「實驗」reporter，另一個報告基因用來檢測實驗條件，類似於內部對照，用於校準「實驗」reporter的數據。通過這種方法，可減少內在的變化因素所削弱的實驗准確性，例如：轉染效率、細胞活性、細胞裂解差異以及加樣操作過程中引起的差異。Promega公司的Dual-Luciferase系統利用螢火蟲和海腎熒光素酶的活性分別檢測實驗組和對照組。螢火蟲熒光素酶是一種分子量為61KD的單體酶，分兩步催化蟲熒光素的氧化反應，產生560nm的光，海腎熒光素酶是一種分子量為36KD的單體酶，催化海腎熒光素的氧化反應，產生中心波長為480nm的藍光。螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶沒有種源同源性，對應不同的反應底物，反應中沒有任何的交叉干擾。

❻ 檢測熒光素酶的酶標儀有什麼要求呢

熒光素酶檢測時，反應是一個很弱的自發光反應，無需外來光源，需要使用發版光檢權測儀來檢測。普通酶標儀檢測的是吸光度，檢測原理與熒光素酶完全不同，無法檢測熒光素酶。
參考：http://www.lumflu.com/A_Info.asp?id=29

❼ 檢測熒光素酶報告基因發出熒光的都有什麼儀器

luminex,
熒光分光光度儀，熒光凝膠成像儀，液閃儀
，熒光酶內標儀，熒光顯微容鏡
都很貴。推薦熒光酶標儀和熒光顯微鏡。
luminex是液體晶元測定，同時檢測30個目的蛋白，定量，靈敏。
熒光分光光度儀用途比較局限，不方便。
熒光凝膠成像儀的對象是凝膠
液閃儀和luminex很像，但是只能檢測一個蛋白或靶標
熒光酶標儀就是酶標儀，但是可以檢測熒光信號，同時可以測定至少96個樣品的單一靶標
熒光顯微鏡不能定量,但非常直觀，可以看到是那些細胞發光，以及發光的部位。而且可以同時看到1-3種熒光，價格比前者低些。

❽ 雙熒光素酶檢測啟動子和熒光定量檢測啟動子有什麼不同

熒光素酶（Luciferase）是生物體內催化熒光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化發光的一類酶的總稱，來自於自然界能夠發光的生物。

自然界存在的熒光素酶來自螢火蟲、發光細菌、發光海星、發光節蟲、發光魚、發光甲蟲等。細菌熒光素酶對熱敏感，因此在哺乳細胞的應用中受到限制。目前，以北美螢火蟲蟲(Photinus pyralis)來源的熒光素酶基因應用的最為廣泛，該基因可編碼550個氨基酸的熒光素酶蛋白，是一個61kDa的單體酶，無需表達後修飾，直接具有完全酶活。

發光機制

生物熒光實質是一種化學熒光。螢火蟲熒光素酶在Mg2+、ATP、O2的參與下，催化D2熒光素(D2luciferin) 氧化脫羧，產生激活態的氧化熒光素，並放出光子，產生550～580 nm 的熒光，其化學反應式如下。

這種無需激發光就可發出偏紅色的生物熒光，其組織穿透能力明顯強於綠色熒光蛋白(GFP)。熒光素酶是靠酶和底物的相互反應發光，特異性很強，靈敏度高，由於沒有激發光的非特異性干擾，信噪比也比較高。

二、熒光素酶報告基因的檢測流程

1、重組質粒制備: 制備含有待檢測基因-Luc/Rluc的重組質粒；
2、細胞系選擇: 根據實驗需要選擇細胞株，通常選擇轉染效率較高的293T細胞或原代細胞等；
3、共轉染: 將帶有Luc/Rluc標記的報告基因和目的基因進行共轉染，設置不同的檢測時間點，一般為24h/48h；
4、外界干預: 轉染後，可進行物理/化學/病毒等的相應刺激；
5、細胞處理: 採用進口/國產雙熒光素酶檢測試劑盒依照protocol操作；
6、熒光檢測: 使用GENios Pro 酶標儀或具有類似檢測功能的設備進行熒光強度檢測。

三、熒光素酶報告基因的優點

1、優越的靈敏度，比Westernbloting靈敏度高1000倍以上；
2、內源性低，哺乳動物無內源性表達；
3、熒光素酶檢測不受細胞內其他物質影響；
4、發光檢測，檢測方便；
5、靈敏度高，10‐20摩爾熒光素酶分子；
6、檢測范圍廣，大於7個數量級。

❾ 檢測熒光素酶報告基因發出熒光的都有什麼儀器

Luminex, 熒光分光光度儀，來熒光凝膠成源像儀，液閃儀 ，熒光酶標儀，熒光顯微鏡
都很貴。推薦熒光酶標儀和熒光顯微鏡。
Luminex是液體晶元測定，同時檢測30個目的蛋白，定量，靈敏。
熒光分光光度儀用途比較局限，不方便。
熒光凝膠成像儀的對象是凝膠
液閃儀和luminex很像，但是只能檢測一個蛋白或靶標
熒光酶標儀就是酶標儀，但是可以檢測熒光信號，同時可以測定至少96個樣品的單一靶標
熒光顯微鏡不能定量,但非常直觀，可以看到是那些細胞發光，以及發光的部位。而且可以同時看到1-3種熒光，價格比前者低些。

❿ 雙熒光素酶報告基因一定要在工具細胞上做嗎

報告基因檢測被廣泛應用於研究基因表達及外部刺激下原核和真核細胞的反應。Luciferase報告基因系統是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統。可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達。但是報告基因實驗中往往會受到各種實驗條件的影響，例如培養細胞的數目和活力的差別、細胞轉染和裂解的效率、以及加樣操作過程中引起的變異。Dual-Luciferase雙熒光素酶報告基因檢測系統中含有在同一細胞中同時表達的兩種熒光素酶。共轉染的「對照」報告基因會作為內對照，減小細胞活性和轉染效率對實驗的影響。因此雙報告系統減少了外部干擾，使得實驗數據更可信。Promega提供了一種先進的雙報告基因技術（Dual-reporter assays）,結合了螢火蟲熒光素酶測試和海腎熒光素酶測試，該技術同時使用兩個獨立的報告基因以提高實驗的准確性，Biotek synergy 系列微孔板檢測儀作為雙報告基因的檢測分析平台獲得了Promega DLR 認證。
在雙報告基因系統中，通常一個報告基因用於檢測特定實驗條件下待測物的反應，即「實驗」reporter，另一個報告基因用來檢測實驗條件，類似於內部對照，用於校準「實驗」reporter的數據。通過這種方法，可減少內在的變化因素所削弱的實驗准確性，例如：轉染效率、細胞活性、細胞裂解差異以及加樣操作過程中引起的差異。Promega公司的Dual-Luciferase系統利用螢火蟲和海腎熒光素酶的活性分別檢測實驗組和對照組。螢火蟲熒光素酶是一種分子量為61KD的單體酶，分兩步催化蟲熒光素的氧化反應，產生560nm的光，海腎熒光素酶是一種分子量為36KD的單體酶，催化海腎熒光素的氧化反應，產生中心波長為480nm的藍光。螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶沒有種源同源性，對應不同的反應底物，反應中沒有任何的交叉干擾。