3dpcr儀器是什麼
1. PCR儀有哪些種類,如何選購
【PCR儀的種類】
分類總是五花八門,總體來說可以分為PCR擴增儀和實時熒光PCR儀兩大類,有人也把它們稱為半自動和全自動,或者定性和定量,都是比較不準確的稱呼。
PCR最重要的就是個升降溫過程,最初的水浴鍋式PCR,就是三個水浴箱,一個機械臂,定時抓出反應槽轉換水浴鍋。這種東東體積大,迅速慢,但其實結果並不比以後的PCR儀差,我現在都很欣賞。後來有人利用致冷和加熱做成了,固定位置升降溫的PCR擴增儀。
後來隨著定量技術的發展,有公司將擴增儀和檢測做成一體,也就成了現在所謂的全自動(或定量)PCR儀。當然標準的叫實時熒光定量PCR儀。
【品牌】
什麼東西都有品牌,現在國內國外PCR儀的品牌很多,就國外而言比較著名的有:
ABI美國應用生物公司:老牌的生物公司貴族,其收購了原來的PE,而PE公司是PCR的鼻祖,旗下有很多經典的PCR儀,有5700(已停產)、7700(已停產)、7000、7900等實時熒光定量PCR儀。
ROCHE羅氏診斷:炙手可熱的新貴,LIGHTCYCLER是其唯一的PCR儀,市場做得很不錯,以科研定位為主,但在國內很多醫院使用,其很特色離心、氣加熱、毛細管等,設計另類,是最有特色的PCR儀,當然好壞另議,就單其另闢蹊徑的技術能力和膽識就值的佩服。
MJ:剛入中國的名流,MJ的擴增儀在生命科研領域比較出名,其產品比較適合高通量檢測,人類基因組計劃用得很多。其實時熒光PCR儀剛進入中國不久,孔間能使用不同溫度是其特色。這點其實比較有用。
伯樂:呵,廉價的麥當勞,ICYCLER是其主打,進入中國已經比較久了,產品和5700一樣,是擴增儀上加裝定量模塊而成,特點是價格較低。
國內現在做的也很多,比如杭州博日、杭州朗基、上海楓嶺、廈門安普利等。
【選購】
准確的講包括實時熒光定量在內都沒有自動加樣和標本處理系統,只能算半自動的。PCR儀是個簡單的東東,一個溫控設備和一個檢測設備而已。
關於溫控,主要是介質問題。理想的介質是導熱性好、比熱大、接觸緊密的東東。
這方面最好的是水浴和油浴,比熱大(油比水更大)、溶劑化物體,與反應物無縫接觸,效果當然最好。但是自動化,小型化難,只有最初的水浴鍋式使用。
硅加熱,這是使用最普遍的一種,優點:易自動化、速度快、直接加熱降溫,效果當然好,但是第一成本較高,第二其使用的介質是金屬,導熱雖然好,但是與反應管,很難做到無縫接觸,定性時代可以加油,但用熒光定最,由於油有熒光信號不能用。所以在無縫接觸上差一些。第三由於是底部加熱,下部壓力較大,有溢出的可能,不過新的儀器在加熱蓋以後解決了這個問題。
空氣加熱,用空氣做介質有優點,與反應體系無縫接觸,但是空氣的導熱性差、比熱小的弱點明顯。因此空氣加熱的要利用離心來產生空氣流動,增強導熱性,同時使用毛細管,加大接觸面積、試劑微量化來彌補。這樣做了以後效果還是不錯。但有的廠商把什麼離心、毛細管的好處大講特講,對氣加熱的弱點閉口不談,卻是高明的市場手法。同時,使用離心,對標本量增大是有影響的並且標本量越大,空氣比熱小的弱點就越明顯,所以空所加熱的儀器標本量都比較小。使用毛細管後由於反應液與管的接觸面積增大,吸附現象更大,因此試劑的通用性差一般要專門開發,成本高,雖然試劑用量少,但因為是專用試劑,每人份就是以實際量算,並不省試劑。反而增加了毛細管成本。
關於功能,所有的PCR儀功能都大體相同。只有MJ孔間能使用不同溫度比較獨特,這對於多項目同時檢測以及循環參數的調整比較有用。但其實時熒光的儀器剛進入中國不久,具體如何還不得而知。
關於選購,根據單位情況而定,由於PCR的技術含量其實並不高,好的國產儀器如杭州博日(與日本著名廠商大和有關)也差不太多。關於進口儀器,羅氏的儀器不錯,但如果標本量大,建議不要用羅氏。一則會累死的。另外,每個標本要分攤的標准曲線、對照成本太高。同時,試劑也比較受限。
2. PCR儀器怎麼用
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發布時間:2007-8-9 瀏覽次數:153次
原理:聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法,在微生物感染的診斷中具有重要的價值。在PCR擴增過程中,擴增的DNA產量是呈指數上升的,經過n個循環的擴增,一個DNA分子的產量便達到2n個拷貝。PCR產物一般為1013拷貝/ml,取0.1ml即為109拷貝,而1mg人基因組DNA才含1.4´106拷貝的單拷貝基因片段,因此使得PCR擴增反應具有強大的擴增能力,提高了檢測的敏感性。此外,利用PCR反應,還能夠對感染因子實施定量分析,實時監測其在宿主體內的動態變化,有利於指導臨床診療。
主體內容(操作步驟,必填項目):
開啟PCR儀電源至ON 位置;屏幕顯示版本信息後,出現step to edit file# 3.
SOAK file# 1的編輯:
file# 1是在某一溫度下持續無限長時間,即只可修改溫度。按 file →1→Enter鍵;顯示SOAK temperature (0-100) 25℃;可根據實驗需要修改溫度,如要30℃,按3,0,再按Enter鍵,顯示End of file,RUN-STORE-PRINT, 按NO,使游標至store 的下方,按Enter 或yes鍵顯示:File store Enter user# 選擇自己的數碼代號,按數字鍵盤後,按Enter鍵,顯示: file store Enter file#選擇空白程序號,按數字鍵盤,按Enter鍵,顯示 Yes to store User # ××× file # ××× 按yes鍵,此號即為用戶存儲程序。
Time delay File # 2 的編輯:
Time delay file #是在某一溫度下保溫有限時間,按 file →2→Enter鍵,顯示:Time delay File Step to edit file # 2 按step 鍵,顯示 delay time (0-999) 7 min 0 sec 按要求修改後按enter鍵,調好min, sec後,顯示beep while delay? NO- YES, 按NO→Enter,顯示 link to a stored file, 若無需連接,按0→Enter, 按NO,讓游標停留在store 下方,按Enter, 按自己的數碼代號,按Enter, 按程序代號,按 yes (yes to store)。
File # 3 的編輯:
File # 3是溫度循環,溫度上升和下降比File # 4慢,編此程序大致同File # 4。
File # 4的編輯:
File # 4是程序循環,溫度上升和下降快。按File → 4→Enter,顯示 step- cycle file Step to edit File # 4, 按step, 顯示:seg1 target temperature 94℃,如需修改則按數字鍵後,按enter, 否則直接按enter, 顯示:seg1 segment time (0-999)1 min 0 sec 修改好min, sec 後,按enter,顯示:seg2 target temperature 37℃ 溫度時間修改方法同上,完成後按enter, 顯示:seg3 target temp 72℃, 溫度時間修改同上,seg 4 全部按0, 按 enter,顯示:auto seg extension NO- YES, 按NO,顯示:auto seg extension,NO- YES,
按enter(step/yes) 回答 yes, 顯示: extension per cycle (0-59)1 如果每個循環是延長1 sec, 按enter, 否則修改後按enter 鍵,顯示:cycle count (1-99)25,修改後, 按 enter 鍵,顯示 link to store file (0-99, 0= shut off) 0,若不與其它程序連接則按0,enter. 若與其它程序連接則按程序號,按enter, end of file RUN –STORE-PRINT 按NO,游標至 STORE 下方,按ENTER,顯示: file store enter file # 按程序代碼,按enter, 顯示 yes to store User # ××× file # ×××按YES.
清除程序
按 file →所要清除的程序號→enter, 按file →clear, 顯示 file # ×× deleted, enter new file #, 這樣你所需要清除的程序被清楚,這一空白程序則可編入新程序。
引用文獻:
本研究所操作規程和網上搜索
3. 請問各位PCR儀器跟試劑盒是什麼關系,是不是做PCR都要用試劑盒試劑盒作用是什麼謝謝
沒關系 試劑盒只是把做某個實驗需要的實際都配套在一起賣叫試劑盒 比如你做PCR要用的酶 buffer 離子啥的 公司把這些擱一起 就叫試劑盒 跟儀器沒關系
4. pcr實驗室都需要哪些儀器
除了PCR儀和凝膠成像儀,還有電泳儀、微型離心機、漩渦振盪器,當然,要是想精細,還得有製作純水的設備
5. PCR儀器的內部構造都是什麼啊什麼樣子
定量PCR儀主要由基本PCR部分、熒光檢測部分和上位計算機部分等組成。基本PCR部分是該儀器的基礎,專包括加熱絲、溫度屬採集與處理等部分,它必須具有精確控溫、快速升降溫、溫度場均一等PCR儀的基本要求,保證PCR過程的順利完成。熒光檢測部分包括激勵光源、光電倍增管、信號採集與處理等部分。上位計算機部分包括數據採集和系統分析軟體,主要負責從下位機採集數據,形成實時圖形,並進行數據處理和圖形分析,得到目標DNA片段的含量和其它檢測報告信息等。工作時,主計算機首先投入運行,同時工作人員把所測樣品放入PCR反映腔體的樣品架上,工作人員根據所測樣品的PCR反應條件設置相應的溫度參數、控溫時間以及循環次數等,接著工作人員點擊相應的按鈕控制項,系統就進入快速升溫、恆溫、快速降溫、恆溫等PCR循環過程,直至所有的循環結柬,同時在每一循環的低溫段恆溫結柬前系統進行樣品的熒光信號實時採集,主計算機根據採集到的信號形成實時圖形,並進行數據處理和圖形分析,得到目標DNA片段的含量和其它檢測報告信息等。
6. pcr儀的用途是啥子
polymerase chain reaction (PCR)
PCR技術類似於DNA的天然復制過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物,由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成
7. 一般常見的PCR儀有哪幾種類型
PCR儀分為:FLAT PCR儀、梯度PCR儀、多通道熒光定量PCR儀、普通PCR儀,分類是五花八門的,主要還是看你需要,要了解詳細找技術人員,如康高特
8. 博日pcr儀屬於什麼醫療器械
我日儀器是屬於常規的醫療熬氧儀器器械。
9. PCR儀器的 SD 實時熒光定量PCR儀器中的「儀器的SD」是指的什麼
sd是標准偏差
10. 請問各位PCR儀器跟試劑盒是什麼關系,是不是做PCR都要用試劑盒試劑盒作用是什麼
沒關系 試劑盒只是把做某個實驗需要的實際都配套在一起賣叫試劑盒 比如你做PCR要用的酶 buffer 離子啥的 公司把這些擱一起 就叫試劑盒 跟儀器沒關系