qpcr用什麼機器檢測

㈠ qpcr怎麼來檢測microrna

提RNA你會吧。。。 反轉錄你會吧。。。如果只是檢測一般的mRNA的表達量 就用poly T反轉錄就專可以了 如果是特殊的屬必須去另外合成特異引物 如果你想得到確切的濃度值 那必須在做RT的時候檢測一個標准品 就是這裡面東西的濃度你是確切知道的 然後做一條標准品曲線 然後拿你要檢測的那個得到的值帶到那個曲線裡面就算出濃度了 大部分時候都是檢測相對含量 就是這個mRNA在不同東西裡面的比較 那就不用做標准品曲線 直接把得到的幾個值比較下關系就可以了 大部分檢測用的內參都是GAPDH 其他還有U6 U7可選

㈡ 熒光定量pcr儀有哪些品牌

進口的有：ABI的，BIO-RAD的iQ5
Applied Biosystems公司的7700型實時熒光定量PCR儀是全球公認的熒光定量PCR的金標准
BIONEER：國內的用戶可能聽說過這個品牌的不多，只有早期較多使用進口引物的實驗室和研究所或留美學者知道這個品牌。Bioneer最初是以高通量的引物合成起家，引物合成在國際上有很高的知名度。後經10幾年發展產品線已覆蓋整個分子生物學領域，目前同takara的產品線幾乎完全一樣。BIONEER的普通梯度PCR儀的價格同其他進口設備的價位比較，很具有殺傷力。這家公司也於2006年底推出了熒光定量PCR儀ExicyclerTM 96，產品技術參數也是採用96孔Peltier半導體加熱，5通道，16bit CCD檢測，也帶有梯度功能。這款產品的參數幾乎與Bio-rad的IQ5一模一樣，而且檢測的CCD像素還要高於IQ5, 理論上檢測靈敏度應該更好一些。產品價格據說還要比Bio-rad更低一些，號稱是性價比最高的熒光定量PCR儀。但是缺點是現在國內用戶很少，了解起來不太容易。有興趣的客戶可以聯系北京力途科技有限公司進行試用，新公司都注重是售後服務，大家畢竟要親身體會到才是最可靠的。
Stratagene：Stratagene現在為安捷倫公司的子公司，也是專著於分子生物學研究產品開發的公司。在國內它的試劑產品賣的不多，處於推廣階段。Stratagene的熒光定量PCR產品Mx3005P同以上兩種產品技術參數也差不多96孔Peltier半導體加熱，5通道，PMT檢測器，但是沒有梯度功能，用戶不能在這台儀器上優化反應條件。另外有客戶反應該儀器做工較粗糙，噪音比較大，而且邊緣的孔做實驗的效果不太好，但是只要使用熱模塊中間的孔做實驗效果還是不錯的。這樣的問題問題在ABI7500儀器上也同樣存在，但是Stratagene的價格要實惠很多。

國產的：
西安天隆科技有限公司的TL988型實時熒光定量PCR儀
杭州博日的FQD-48A

㈢ 實時熒光定量PCR（qPCR）用什麼試劑盒比較好

實時熒來光定量PCR（自qPCR）用什麼試劑盒比較好
加入熒游標記探針，巧妙地把核算擴增、雜交、光譜分析和實時檢測技術結合在一起，藉助於熒光信號來檢測PCR產物。一方面提高了靈敏度，另一方面還可以做到PCR每循環一次就收集一個數據，建立實時擴增曲線，准確地確定CT值，從而根據CT值確定起始DNA的拷貝數，做到真正意義上的DNA定量。另外由於CT值是一個完全客觀的參數，CT值越小，模版DNA的起始拷貝數越小。因此，利用CT值確定DNA拷貝數實時PCR方法比普通終點定量方法更加准確

㈣ 如何採用QPCR檢測超低表達的目的基因

如何採用QPCR檢測超低表達的目的基因
如果避免了預擴增，數據可轉換成絕對的cDNA數量，否則數據分析可以Cq值來開展，因為每個細胞的轉錄本水平呈對數正態分布。一開始，可以各種方法對數據作圖，此外，基本的統計分析也應開展（如陽性細胞的數量、平均值和偏差）。細胞數量測定通常是以驗證過的參考基因來均一化的。這種策略在單細胞分析中應避免，因為單個細胞中的所有轉錄本水平隨時間變化。我們發現，校正分析和無監督演算法（如Kohonen self-organizing maps）對定義亞群和基因網路很有用。Finn-Arne Weltzien（挪威獸醫學院）
我們在利用單細胞qPCR進行定量測定時很小心。我們通常只進行定性分析。如果我們定量，我們會利用目的基因的拷貝數相對參考基因的拷貝數。Weiwen Zhang（亞利桑那州立大學，現在天津大學）
對於每個單細胞，我們對目的基因和參考基因進行qPCR分析，如原核生物的16s rRNA和真核生物的28s或actin。不過，我們也注意到，這些常用參考基因的表達水平在單細胞中也差別很大，對大量細胞qPCR的標準定量法則也須特別謹慎。在大部分情況下，我們報告原始和均一化的Ct值，並使用它們進行單細胞qPCR結果的定量。Q6：您分析時使用哪些生物信息學工具？Mikael Kubista（TATAA生物中心）

㈤ 數字PCR檢測方法如何選擇

數字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一種核酸分子絕對定量技術。相較於qPCR，數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的絕對定量。

在定量PCR時，我們常常糾結一個問題，究竟是相對定量還是絕對定量呢？如今，你無需糾結了，因為數字PCR（digital PCR）來了。盡管這兩種技術有些類似，都是估計起始樣品中的核酸量，但它們有一個重要的區別。定量PCR是依靠標准曲線或參照基因來測定核酸量，而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的絕對定量。因此特別適用於依靠Ct值不能很好分辨的應用領域：拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究（如等位基因不平衡表達）、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。

原理

PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下，DNA聚合酶依賴的酶促合成反應，擴增的特異性取決於引物與模板DNA的特異結合。

數字PCR可以實現更高准確性、靈敏度和絕對定量

數字PCR是一種核酸檢測和定量分析的新方法，可以作為傳統實時定量PCR的替代方法，以實現絕對定量及稀有等位基因的檢測。數字PCR的工作原理在於將DNA或cDNA樣品分割為許多單獨、平行的PCR反應，部分這些反應包含了靶標分子（陽性），而其他不包含（陰性）。單個分子可以被擴增一百萬倍或更多。在擴增期間，TaqMan化學試劑及染料標記探針可用於檢測特定序列的靶標。當不存在任何靶標序列時，沒有信號累積。PCR分析後，陰性反應片段用於生成樣品中靶標分子的絕對計數，而無需標准品或內標。  

納流晶元的使用提供了便捷和直觀的機制來同時平行運行上千個PCR反應。每個孔都加入了樣品、擴增混合物和 TaqMan測定試劑的混合物，然後進行單獨分析以檢測存在（陽性）或不存在（陰性）終點信號。考慮到孔可能接收到多個靶標序列分子，使用泊松模型應用了一個校正因子。

 
以上來自網路。

㈥ 用普通pcr qpcr 檢測基因 有什麼區別

兩者的區別就在於後者可以半定量，前者主要看目的基因有沒有

㈦ 如何用qpcr檢測細胞是否可以產生某蛋白質

如果避免了預擴增，數據可轉換成絕對的cDNA數量，否則數據分析可以Cq值來開展，因為每個細胞的轉錄本水平呈對數正態分布。一開始，可以各種方法對數據作圖，此外，基本的統計分析也應開展（如陽性細胞的數量、平均值和偏差）。細胞數量測定通常是以驗證過的參考基因來均一化的。這種策略在單細胞分析中應避免，因為單個細胞中的所有轉錄本水平隨時間變化。我們發現，校正分析和無監督演算法（如Kohonen self-organizing maps）對定義亞群和基因網路很有用。Finn-Arne Weltzien（挪威獸醫學院）
我們在利用單細胞qPCR進行定量測定時很小心。我們通常只進行定性分析。如果我們定量，我們會利用目的基因的拷貝數相對參考基因的拷貝數。Weiwen Zhang（亞利桑那州立大學，現在天津大學）
對於每個單細胞，我們對目的基因和參考基因進行qPCR分析，如原核生物的16s rRNA和真核生物的28s或actin。不過，我們也注意到，這些常用參考基因的表達水平在單細胞中也差別很大，對大量細胞qPCR的標準定量法則也須特別謹慎。在大部分情況下，我們報告原始和均一化的Ct值，並使用它們進行單細胞qPCR結果的定量。Q6：您分析時使用哪些生物信息學工具？Mikael Kubista（TATAA生物中心）

㈧ 定量PCR裡面FAM、ROX、HEX、CY5檢測通道的發射光和接受光譜是多少

如圖所示：

普通的PCR大多數是定性實驗，而實時熒光定量PCR則定量和定性都可以做內。應用領域也容不一樣，普通PCR一般應用於基因組克隆、DNA測序、RNA反轉錄等，而實時熒光定量PCR一般應用於mRNA表達量分析、絕對定量、蛋白表達、SNP分析、陰陽性解析等領域。

調度電力系統的電力和進行電力系統規劃。電力系統的負荷涉及廣大地區的各類用戶，每個用戶的用電情況很不相同，且事先無法確知在什麼時間、什麼地點、增加哪一類負荷。因此，電力系統的負荷變化帶有隨機性。

(8)qpcr用什麼機器檢測擴展閱讀：

實時熒光定量PCR是利用熒光信號的變化，實時檢測PCR擴增反應中每次循環擴增產物量的變化，通過循環閾值和標准曲線的分析對標本中起始模板拷貝數進行定量分析。

在實時熒光定量PCR進程中，每次循環進行一次熒光信號的收集，以熒光強度為縱軸，循環次數為橫軸，所得到的曲線稱為PCR擴增曲線。

在前面十多次循環中，雖然目標產物呈指數增加，但其引發的熒光總強度未達到儀器的檢測限，所以儀器檢測到的熒光強度無變化，該時間段熒光強度的平均值稱為基線。當熒光信號達到一定強度後，熒光強度的増加才能夠如實地被檢測儀器檢測到。

㈨ qPCR 幾通道 是什麼意思 好像有4 6 8 通道

應該復指的是real-time pcr儀的通制道，雙通道、四通道、六通道等等。
多通道指可同時檢測一個樣品中的多種熒光，儀器就可以同時檢測單管內多模版或者內標+樣品，通道越多，儀器適用范圍越寬、性能就更強大。

㈩ 請問實驗室的常用技術PCR,qPCR,rtPCR，western blot 分別是為了什麼目的進行的實驗

pcr 常用就是擴基因，來提完自rna後反轉啊，那你擴來基因用做什麼就需要你來看了。
菌落PCR，也是擴，放大數目，好驗證。
qPCR是熒光染料，做定量，一般是看錶達，就是基因的表達情況，基因層面
rtPCR是半定量，相對上面的定量來說沒有完全量化，相當於是質化，也能看出問題
western 是做蛋白的