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用什么酶切割运载体

发布时间: 2021-01-10 03:42:44

❶ 用同种限制酶切割运载体与目的基因的dna片段或相同黏性末端

A、用同种限制酶切割运载体与目的基因可获得相同的黏性末端,这样便于目的基因与运内载体连接形成重组容DNA分子,A正确;
B、限制酶的作用部位是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,B错误;
C、基因工程在农作物育种、药物研制等方面都有很重要的应用,C正确;
D、基因工程所用的工具是限制酶、DNA连接酶和运载体,D正确.
故选:B.

❷ 目的基因和运载体不是应该用同种限制酶切割的吗为什么这个题用不同种

目的基因和运载体不是应该用同种限制酶切割的
A、限制性内切酶能够识内别双链DNA分子的某容种特定核苷酸序列,并且切割形成特定的粘性末端,A正确;
B、真核生物基因有编码区和非编码区之分,并且编码区包括外显子和内含子,而以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因只包含外显子,没有内含子和非编码序列,因此与原基因的碱基序列不同,故B错误;
C、目的基因在受体细胞中成功表达才表示基因工程操作成功,仅仅检测到受体细胞含有目的基因,并不代表该基因可以正常的转录和翻译,故C错误;
D、质粒中抗生素抗性基因一般用于检测目的基因是否成功导入受体细胞中,故D错误.

❸ 运载体为什么必须具备多个限制性酶切位点

作为载体,我们期望它可以运载不止一种外源基因片段,而不同基因片段对dna内切酶的要版求或偏好是不权一样的,因为不同基因其dna序列存在差异。所以针对差异,仅有可能只有一种内切酶可以达到完美切割的效果,而载体也必需要用同一种酶切割保证切口可以无缝对接。一个质料载体要具有携带多种外源基因的能力就必需具备多个限制性内切酶的位点。

❹ 为什么用相同的限制酶切运载体和目的基因

不同的限制酶的切口不同,不同的切口无法连接.

❺ 1.将目的基因和运载体连接起来需要哪些工具对限制酶的原则上的要求是什么

基因工程中,构建基因表达载体时,首先用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,以产生相同的黏性末端,其次再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子.
故选:B.

❻ 是否可以用不同的限制酶分别对含目的基因的DNA和运载体进行酶切处理理由是

通常只用一种限制酶。
用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生平末端。
若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生相同黏性末端的限制酶。

❼ 今日课堂作业:用同一种限制酶切割运载体和目的基因,他们有哪些连接方式

具有相同黏性末端的DNA会连接在一起。因此用同一种限制酶切割运载体和目的基因,有3种连接方式:目的基因和目的基因连接、目的基因和运载体连接、运载体和运载体连接。

❽ 为何通常用两种限制酶同时切割目的基因和运载体

两种不同复的限制性内切酶制识别并切割的序列是不同的,也就是两种酶分别切割了基因和载体时,产生了两个切口,这两个切口不是粘性末端,不能互补配对,所以不可能连接在一起,如果用一种酶来切那么这样基因中或者是载体上就会有相同的粘性末端,这样基因本身除了切下来的那段之外,剩下的部分在连接酶作用下相同的粘性末端就会配对连接,同样载体也会继续连接成环,基因和载体连在一一起也有,而且首尾的顺序也有两种,连接体系跑电泳结果会有4个条带,至少是4种,而且就算那个连接后的片段大小符合你要求的那段纯化后也有一部分是不能表达的.哪四种就不用写了,你肯定知道的,不能表达的那部分就是顺序不对的,这就是同种酶切连接的缺陷性.

❾ 用同一种限制酶切割后的运载体与目的基因连接方式有

3种是考虑两两相互连接形成的,具体的目的基因之间和目的基因与运载体之间以及运载体之间。因为同一种限制酶切下的粘性末端是相同的,可以实现碱基互补配对。

❿ 切割运载体和目的基因往往是用同一种限制酶还是两种

往往是一种。不过我看为了准确,两种更好一点。用同一种的话,可能会自身环化

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