如何将BamH一切割的载体

❶ 谁用过TAKARA的AFLII，我载体是AFLII和BamHI酶切，片段是AFLII和BgLII双切，老是连接不上，帮帮忙

1、首先你得确来定你的载体和目自的基因的质粒有没有问题；酶以及水等是否有污染
2、要能确定你是否双切开了，有可能根本没切开或者只切开了一段
3、如果都切开了，那是否你胶回收浓度很低，以致不能保证连接所需的浓度
4、你说转化没问题，那就考虑前三个就可以了

❷ bamhi hindiii酶切位点

这个基于你的片段中的酶切位点,如果你的片段中含有和载体中位点一致的序列,那你就不能取这个位点,因为酶切时会把你的片段切开,可以选你的片段中没有的位点,设计引物

❸ 哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点

Takara公司的pMD19T simple载体，货号为3271.

T-Vector
pMD19 (Simple) 是两侧的3’ 端添加了 “T” 的线性化载体，因版大部分耐热性DNA聚合酶进行权PCR反应时都有在PCR 产物的3’
末端添加一个 “A” 的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。本载体尽管消除了LacZ基因上的多克隆酶
切位点，但不影响β-半乳糖苷酶的正常表达，因此，PCR产物克隆后仍可以利用α-互补性进行蓝白菌落的筛选，挑选阳性克隆。由于本载体上消除了多克隆酶
切位点，克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下，需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。本制品中的Control Insert
(500 bp) 还可以用于Control反应。

pMD19T simple载体图谱如下：

更多pMD19T simple载体信息，请见http://www.biofeng.com

❹ 假设一基因表达载体上仅有EcoR1限制酶和BamH1限制酶的切割位点（个数未知）

BamH1EcoR1 5.5kb 6kb
头------BamH1---------EcoR1---------BamH1---尾
头尾是相连成环形 中间有2.5kb

❺ bamh i和xba i是双酶切吗 载体是puc18

你好，尊敬的网络知道用户朋友，很高兴为你解答问题！

都不是的，他们都是采用了另一种的切割方式的

如果您还有疑问请继续询问，很高兴为您解答！

❻ pET15b空载用Nde I和BamH I酶切怎么才算切完全

切三小时应该就差不多了 你切完跑胶回收 旁边点一道没有切的载体 对照着看就知道哪条是切开的了

❼ 我用pETDuet-1 这个载体的BamHI和XhoI酶切可以吗

斐林试验主条目：抄斐林试剂（新制氢氧化铜）（甲液：0.1g/ml的NaOH 乙液：0.05g/ml的CuSO4） 注意事项：1.还原糖主要有葡萄糖、果糖、麦芽糖 2.甲乙两液必须等量混合均匀后再加入样液,现配现用 3.必须用水浴加热[1] 斐林试验大致和本纳德试验相同,只是将本纳德试剂中的硫酸铜和酒石酸钠分开为两种试剂.葡萄糖验证：验证醛基 1.葡萄糖溶液与新制氢氧化铜浊液反应生成砖红色沉淀 CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O如果溶液中还原糖含量较低,产生的氧化亚铜便会较少,试验后只会有绿色、混浊的黄色或橙色等.在酸性环境中,Cu2 会变得较为稳定,不容易发生反应,所以不能进行试验.醇和醛在这测试亦会产生砖红色沉淀物,因为两者都具有在这试验中产生作用的官能团.

❽ 载体双酶切后消失，怎样解决

fermentas 目录上有,bamh1 ph大于8.0时有很强的星号活性，bufferR ,ph 8.5,可以换buffer G试下

❾ 我想用puc19克隆目的基因，如果用HindIII和BamHI酶切位点的话，我的目的基因N端会带上多长的来自于载体的

斐林试验
主条目：斐林试剂（新制氢氧化铜）（甲液：0.1g/ml的NaOH 乙液：0.05g/ml的CuSO4）回 注意事项：1.还原答糖主要有葡萄糖、果糖、麦芽糖 2.甲乙两液必须等量混合均匀后再加入样液，现配现用 3.必须用水浴加热[1] 斐林试验大致和本纳德试验相同，只是将本纳德试剂中的硫酸铜和酒石酸钠分开为两种试剂。 葡萄糖验证：验证醛基 1.葡萄糖溶液与新制氢氧化铜浊液反应生成砖红色沉淀 CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O如果溶液中还原糖含量较低，产生的氧化亚铜便会较少，试验后只会有绿色、混浊的黄色或橙色等。 在酸性环境中，Cu2 会变得较为稳定，不容易发生反应，所以不能进行试验。 醇和醛在这测试亦会产生砖红色沉淀物，因为两者都具有在这试验中产生作用的官能团。

❿ 如何在引物中加入HindⅢ和BamHI酶切位点

先设计好正反引物，顺序是5到3，分别在5端加上hindIII和BamHI的酶切位点就可以了。
比如:
正向引物专F:AAGCTT-atgcatgctgcatgcatgc
反向属引物R:GGATCC-catgcatgatgcacatgcta
按照试验的具体情况，还可以在前面加上保护碱基，这个你在网上可以搜到。如果连T载体再酶切的话，就没什么必要了。