用什么限制酶切割目的基因

Ⅰ 为什么要两种酶才能切割基因（两端要不同的限制酶），不能是同一种吗

切割目的基因时同种序列当然可以用同种限制酶切割；但有时也用不同种的限制性酶专割。属
用不同限制酶切割的目的是：保证目的基因和质粒（运载体）的准确连接，避免无效连接（如：目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等）过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理：
虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列，但两种限制酶识别的序列可以相包含，例：酶A识别GGATCC序列，酶B识别GATC序列，则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。哪里不明白请追问，满意请采纳，希望对你有帮助~

Ⅱ 为什么用限制酶切割目的基因时候需要使用两种以上不同的限制酶进行切割

为了防止目的基抄因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体，防止反向连接。

限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。

(2)用什么限制酶切割目的基因扩展阅读：

限制作用实际就是限制酶降解外源DNA ，维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。

与第一型限制酶类似，同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列，切割位与识别序列约距24-26个碱基对。

为有效的切割DNA，必须同时考虑DNA甲基化和限制酶对该类型甲基化的敏感性。另外，大部分商业限制酶如今专门用于切割甲基化DNA。

Ⅲ 基因工程用限制酶切割目的基因的原料是什么

我猜基因文库，猜的勿喷。

Ⅳ 在什么情况下，切割目的基因和载体时使用不同种限制酶

如果要获得互补的缺口用于连接，而载体或目标片段上又有多个酶切位点，如果有同尾酶的话就可以使用。一般情况下切割载体和目的基因需要使用相同的酶，偶尔也会使用不同的同尾酶。

Ⅳ 选用限制酶切割目的基因时,只要目的基因两端的序列中含有该酶的识别序列即可

(1)限制酶Ⅱ限制酶Ⅰ (2)物质循环再生原理、系统学与工程学原理、整体性原理、协调与平衡原理 植被的恢复

Ⅵ 基因工程操作中，用的三个限制酶(一个切割质粒，两个切割目的基因)都可以不同吗，也就是可以是三种吗

标题的理解不来对。
限制自酶切基因的目的是为了露出相匹配的单链末端，即切割后目的基因的一个末端会和质粒的末端相匹配，就可以连起来，而为了获得相匹配的末端则需要同一种限制酶。
所以，如果用一个限制酶切质粒的话，目的基因的两端都要和质粒末端相匹配，切目的基因的限制酶也是那一个，就是一种限制酶。
如果用两个限制酶切质粒的话，目的片段的两端分别是2种相匹配的，需要用2种限制酶切。就是总共2种限制酶。不存在标题的情况。

Ⅶ 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是--G

好吧 之前弄来错了 一般情况下，要把源目的基因连接，需要用同一种或同两种限制性内切酶酶切质粒和目的基因。在本题中，酶II的识别序列是酶I识别序列的一部分，如果质粒用酶II处理，那么在geneI和II区都会被切断，质粒变成了两段线性序列。所以质粒只能由酶I酶切。
如果目的基因用酶I处理，那么目的基因与质粒只有一段能够相连(目的基因的左边被酶I切割形成粘性末端，质粒gene I区被酶I切割成粘性末端。但是目的基因的右端不能被酶切，所以不能与质粒相连)。
用酶I切割质粒后，gene II区形成两个粘性末端（GATC）；用酶II切割目的基因后，两段形成的粘性末端均为GATC。两者可以连接，形成闭合环状。

Ⅷ 限制酶怎么切割目的基因图解

因为要获得一个目的基因,需将此目的基因两边多余的脱氧核苷酸切除掉,因此有两个切口,又DNA分子是双链的,所以有4个磷酸二酯键被切.

Ⅸ 为什么用两种限制酶切有两种不同的目的基因（产生两种

为什么用两复种限制酶切有两种不同的目制的基因
用A、B两种酶切出目的基因来，可以防止自环。然后再用A、B酶去切质粒，也可防自环，且得到与目的基因互补的黏性末端，才能连接目的基因。所以，既要用两种不同酶切，还要保证质粒和目的基因一样的两种酶。两种不同的限制性内切酶识别并切割的序列是不同的,也就是两种酶分别切割了基因和载体时,产生了两个切口,这两个切口不是粘性末端,不能互补配对,所以不可能连接在一起,如果用一种酶来切那么这样基因中或者是载体上就会有相同的粘性末端,这样基因本身除了切下来的那段之外,剩下的部分在连接酶作用下相同的粘性末端就会配对连接,同样载体也会继续连接成环,基因和载体连在一一起也有,而且首尾的顺序也有两种,连接体系跑电泳结果会有4个条带,至少是4种,而且就算那个连接后的片段大小符合你要求的那段纯化后也有一部分是不能表达的.哪四种就不用写了,你肯定知道的,不能表达的那部分就是顺序不对的,这就是同种酶切连接的缺陷性.

Ⅹ 为何通常用两种限制酶同时切割目的基因和运载体

两种不同复的限制性内切酶制识别并切割的序列是不同的,也就是两种酶分别切割了基因和载体时,产生了两个切口,这两个切口不是粘性末端,不能互补配对,所以不可能连接在一起,如果用一种酶来切那么这样基因中或者是载体上就会有相同的粘性末端,这样基因本身除了切下来的那段之外,剩下的部分在连接酶作用下相同的粘性末端就会配对连接,同样载体也会继续连接成环,基因和载体连在一一起也有,而且首尾的顺序也有两种,连接体系跑电泳结果会有4个条带,至少是4种,而且就算那个连接后的片段大小符合你要求的那段纯化后也有一部分是不能表达的.哪四种就不用写了,你肯定知道的,不能表达的那部分就是顺序不对的,这就是同种酶切连接的缺陷性.