怎么切割目的基因与载体

A. 在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因，为什么

质粒是一个闭合的DNA圆圈，你得先切开它，把它切成一条线；然后你再从一长串专DNA上切下你要的目的片段，属用连接酶像胶水一样，吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了，但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了。

由于载体质粒只有圆圈状才有活性，才有用，所以你必须这么做。。。

B. 获得目的基因后要与载体连接，那么目的基因还要剪切过吗要是不剪切，就没有粘性末端，怎么与载体连要

通常扩增基因所使用的引物两端会人为添加特异的酶切位点，连接过程中的酶切过程不影响基因本身的编码序列。

C. 基因工程中切割载体和含目的基因的DNA片段是需使用同种限制酶是为什么是怎么切割怎么连的，能不能简述

所用的同种限制酶是限制性内切酶，也叫做内切酶，至于具体用哪回个内切酶，要根据答你要切的序列进行分析，分析的软件很多，比如OMIGA，MEGA，primer premier......
至于怎么切割怎么连，下面已经说的很清楚了，简说，就是识别-切割-连接。

基因工程的主要步骤：
1.目的片段的分离与合成，获得目的片段
2.目的片段与载体连接（载体有两种，一种叫做克隆载体，为了大量获得该片段，并对在片段在基因层面进行研究；另一种叫做表达载体，为了将目的片段翻译成蛋白，对蛋白进行研究）；
3.含有目的片段的载体导入宿主细胞内
4.对宿主进行检测和筛选，主要检测是否导入成功，和导入的基因是否你所要的；

D. 在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因,为什么

质粒是一个闭合的抄DNA圆圈袭,你得先切开它,把它切成一条线；然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了.
由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做.

E. 基因工程中 切割目的基因和载体所用的限制酶及切口必备的特点

在基因工程操来作中为了获得源重组质粒，一般用相同的限制性内切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，以露出相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接形成重组质粒；也可以用不同的限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，但露出的粘性末端相同，再用DNA连接酶连接．
故选：A．

F. 在什么情况下，切割目的基因和载体时使用不同种限制酶

如果要获得互补的缺口用于连接，而载体或目标片段上又有多个酶切位点，如果有同尾酶的话就可以使用。一般情况下切割载体和目的基因需要使用相同的酶，偶尔也会使用不同的同尾酶。

G. 用同种限制酶切割目的基因和载体，有多少种连接方式

用同种限制酶切割目的基因和载体，有三种连接方式。载体的自身环化，目的基因的自身环化，载体和目的基因的连接。

H. 构建好的载体 怎么把目的基因切掉 重做

一般构建载体时，会将目的基因和载体用相同的内切酶切出一定的序列，再用连接酶连接而成；所以想切掉目的基因很简单，就是再用之前的内切酶进行切除就好了。

I. 限制酶切割目的基因和载体用同一种酶，但是目的基因切两个割下来 ，载体只切一刀，怎么用同种酶

限制酶切割目的基因和载体用同一种酶，但是目的基因切两个割下来 ，载体只切一刀，怎么用同种酶？？？
分子生物学 生物化学 微生物 脱氧核糖核酸（DNA） 生

J. 基因工程中,切割目的基因和载体

切割载体和含有目的基因的DNA片段后形成的黏性末端，只有存在互补序列才能连接形成重组DNA片段，欲获得存在互补碱基序列的黏性末端一般需使用同种限制酶切割．
故选：A．