限制酶切割哪里

⑴ 限制性内切酶切什么位置

3,5-磷酸二酯键

⑵ 限制酶切割的到底是哪个位置不要说是磷酸二酯键，我要具体的说明

图中2的位置

⑶ 限制酶切割目的基因是在体外

载体原本是一个来环状的源,要插入一条目标基因,就要把环状载体切开,就用刀限制酶来切.但是如果载体和目标基因都有这个限制酶对应的切点,那么限制酶不仅会把载体切开成条带状,也会把目标基因切成两段.把载体切成条带状正是我们需要的,但是把目标基因切成两段是不对的,这样会使目标基因失去原有的表达作用.

⑷ 限制性核酸内切酶切割的原理和方法是什么

限制性核酸内切酶切割的原理：限制性核酸内切酶作用于双链DNA的磷酸二酯回键，这种酶能识别特定的碱基答序列，并且有特定的切割位点。

不同的限制性内切酶作用方式都不一样。不过大体来说，限制性内切酶都能够特异性识别并结合核酸的特殊反向回文序列（Inverted repeat palindromes ），然后催化断裂核苷酸链。

⑸ 要怎么样限制酶才能完全切割

1.限制性内切酶，有2到3个单位就可以了，检查一下酶的质量，把酶切温度提高到37度试试，如果内手中有别的容适合的限制性内切酶，可以做一下对照
2.溶在双蒸水里，如果你的TE 浓度不对（比如过浓），会影响酶切的。一般情况下，用于保存的质粒才用TE溶，酶切的还是用水好。再就是最好用试剂盒提，自己配的试剂不定什么地方有问题呢，如果离心管和枪头是国产的，最好用蒸馏水洗过烘干再用

⑹ 限制酶怎么切割目的基因图解

因为要获得一个目的基因,需将此目的基因两边多余的脱氧核苷酸切除掉,因此有两个切口,又DNA分子是双链的,所以有4个磷酸二酯键被切.

⑺ 限制酶还能切割RNA吗

不能。限制酶又称限制性核酸内切酶，专一对DNA起作用。
限制性核酸内切回酶是可以识别特定的核苷酸序答列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。根据限制酶的结构，辅因子的需求切位与作用方式，可将限制酶分为三种类型，分别是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。

⑻ 3．下表为5种限制性核酸内切酶（ 以下简称“限制酶”）的识别序列和切割位点（箭头位置），

应该选D

C的答案比较难理解，大家都知道不同的酶产生的粘性末端可以相同，所以D的答案很容易理解，如BgI II、BamH I两种限制酶。但也有些酶比较特殊，同种酶切出来的粘性末端是不一样的，如BbvC

根据限制酶切割的特点，可将它们分为两大类：一类是切割部位无特异性的；另一类是可特异性地识别核苷酸序列。这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列，也就是在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。

有一些限制酶的识别序列不是对称的，如 AccBSⅠ 和BssSⅠ
AccBSⅠ CCG↓CTC BssSⅠ C↓TCGTG
GGC↑GAG GAGCA↑C
有一些限制酶可识别多种序列，如 AccⅠ 识别的序列是 GT↓MKAC ，也就是说可识别 4种序列，其中两种是对称的，另两种是非对称的。
有一些限制酶识别的序列呈间断对称，对称序列之间含有若干个任意碱基。如AlwNⅠ 和DdeⅠ，它们的识别序列如下。
AlwNⅠ CAGNNNC↓TG DdeⅠ C↓TNAG
GT↑CNNNGAC GANT↑C

限制酶在特定切割部位进行切割时，按照切割的方式，又可以分为错位切和平切两种。
（1）识别位点为回文对称结构的序列经限制酶切割后，产生的末端为匹配粘端，亦即粘性末端，这样形成的两个末端是相同的，也是互补的。
（2）平末端在回文对称轴上同时切割 DNA 的两条链，则产生平末端
（3）非对称突出端
许多限制酶切割 DNA 产生非对称突出端。当识别序列为非对称序列时，切割的DNA 产物的末端是不同的，如 BbvCⅠ，它的识别切割位点如下。
-CC↓TCAGC- 产生的粘性末端为 -CC 和 TCCAGC-
-GGAGT↑CG- -GGAGT CG-
有些限制酶识别简并序列，其识别的序列中有几种是非对称的。如AccⅠ，它的识别切割位点如下，其中GTAGAC和 GTCTAC 为非对称。
GT↓AT/CGAC
CATA/GC↑TG

⑼ 为什么用限制酶切割目的基因时候需要使用两种以上不同的限制酶进行切割

为了防止目的基抄因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体，防止反向连接。

限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。

(9)限制酶切割哪里扩展阅读：

限制作用实际就是限制酶降解外源DNA ，维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。

与第一型限制酶类似，同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列，切割位与识别序列约距24-26个碱基对。

为有效的切割DNA，必须同时考虑DNA甲基化和限制酶对该类型甲基化的敏感性。另外，大部分商业限制酶如今专门用于切割甲基化DNA。

⑽ 什么叫限制酶切割位点

基因工程中的构建基因表达载体需用到限制酶和DNA连接酶，限制酶会内识别限制酶切容割位点(即某个DNA序列，如AACC--TTGG，当然，不同的限制酶作用位点不一)，限制酶能将磷酸二酯键切断，不是随便切断，而是特定的。