目的基因怎么切割的酶
❶ 两种酶怎么切割DNA请画图,还有目的基因的切割
这是高中生物选修阶段的内容,DNA有链装和环装两种,两种酶的切割位点未知,目的回基因也不知道是答处于哪个位置,建议给出具体的题目来更好的解答。
如果要获取目的基因,那两种酶不能破坏他,然后用两种酶可以防止自身环化
❷ 基因工程里,用两种不同的限制酶一起切割质粒和含目的基因的DNA,可以防止质粒和目的基因自身环化,那
取下一段目的基因要切两次,也就是说这里切的两次可以分两种不同的酶版来切,同样的,载权体也需要切两次同样也是用这两种酶来切,这样有两组碱基的互补配对,就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。(不太确定啊。。。。。)
❸ 怎么单酶切, 单酶切后 怎么把目的基因连到已经酶切过的载体上 如何防止自连
单酶切要想防止自连,最好的办法是把载体酶切产物脱磷酸。脱了专磷酸的载体就无法属自连,它只能和目的片段连接。
如果不想脱磷,可以在连接反应体系中加大目的片段的数量,提高阳性克隆的比例,但这不能完全避免自连。
不过最好的办法还是做双酶切。单酶切连接实在麻烦。
❹ 限制酶切割目的基因和载体用同一种酶,但是目的基因切两个割下来 ,载体只切一刀,怎么用同种酶
限制酶切割目的基因和载体用同一种酶,但是目的基因切两个割下来 ,载体只切一刀,怎么用同种酶???
分子生物学 生物化学 微生物 脱氧核糖核酸(DNA) 生
❺ 获得目的基因地方法有哪两种切割和连接分子所使用得酶分别是什么
根据所需目的基因的来源,有分离自然存在的基因或人工合成基因.常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选.
切割和连接分子所使用得酶根据不同的题目有所不同.
❻ 目的基因和运载体不是应该用同种限制酶切割的吗为什么这个题用不同种
目的基因和运载体不是应该用同种限制酶切割的
A、限制性内切酶能够识内别双链DNA分子的某容种特定核苷酸序列,并且切割形成特定的粘性末端,A正确;
B、真核生物基因有编码区和非编码区之分,并且编码区包括外显子和内含子,而以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因只包含外显子,没有内含子和非编码序列,因此与原基因的碱基序列不同,故B错误;
C、目的基因在受体细胞中成功表达才表示基因工程操作成功,仅仅检测到受体细胞含有目的基因,并不代表该基因可以正常的转录和翻译,故C错误;
D、质粒中抗生素抗性基因一般用于检测目的基因是否成功导入受体细胞中,故D错误.
❼ 为什么要两种酶才能切割基因(两端要不同的限制酶),不能是同一种吗
切割目的基因时同种序列当然可以用同种限制酶切割;但有时也用不同种的限制性酶专割。属
用不同限制酶切割的目的是:保证目的基因和质粒(运载体)的准确连接,避免无效连接(如:目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等)过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理:
虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列,但两种限制酶识别的序列可以相包含,例:酶A识别GGATCC序列,酶B识别GATC序列,则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。哪里不明白请追问,满意请采纳,希望对你有帮助~
❽ 限制酶怎么切割目的基因图解
因为要获得一个目的基因,需将此目的基因两边多余的脱氧核苷酸切除掉,因此有两个切口,又DNA分子是双链的,所以有4个磷酸二酯键被切.
❾ 目的基因酶切后电泳图怎么看高中选修三的问题谢谢各位了
首先需要知道是双酶切还是单酶切
1、单酶切
一般这种情况会根据实际大小进行判断,专对于质粒来讲,有三种情况,属线性质粒、超螺旋、开环结构三种,其在琼脂糖凝胶重的大小是不一样的,大小顺序,从上往下看:
开环>线性>超螺旋。
一般单酶切之后,此时的情况类似于开环结构,显示的是整个质粒的全长,此时对于maker去比对即可。
2、双酶切位点情况
这类情况被双酶切之后,产物里面有两个片段分布,一个大片段,一个小片段,从琼脂糖凝胶电泳中看,前为小片段,后为大片段。
我们再根据目的片段和质粒的实际长度对比切割后各自的长度得到我们的目的片段分布位置即可。
右侧两个为质粒对照
注意事项:
1、注意调整切割时间,尽量切割完全。
2、电泳时设置对照实验。
3、注意单酶切和双酶切位点的区分。
❿ 如何在目的基因的两侧接上限制性核酸内切酶酶切位点
在目抄的基因的两侧接上限制性核酸内切酶酶切位点的方法是:利用基因重组技术,讲限制性核酸内切酶识别序列连接在目的基因两侧。
一,原理:在目的基因的两侧接上限制性核酸内切酶酶切位点的原理是基因重组。此时,目的基因就相当于一段已知的脱氧核糖核苷酸序列。用dna连接酶讲限制性核酸内切酶的识别序列连接在其两端即可。
二,操作步骤:首先要找到想要的限制性核酸内切酶的识别序列,然后用pcr合成仪对这段序列进行扩增。最后再用dna连接酶连接在目的基因上即可。