酶如何切割dna
A. 两种酶怎么切割DNA请画图,还有目的基因的切割
这是高中生物选修阶段的内容,DNA有链装和环装两种,两种酶的切割位点未知,目的回基因也不知道是答处于哪个位置,建议给出具体的题目来更好的解答。
如果要获取目的基因,那两种酶不能破坏他,然后用两种酶可以防止自身环化
B. 不同限制酶切割dna的位点不同
AC、一种限制酶能识别一种特定的核苷酸序列,并能在特殊位点切割DNA分子,专A正确,C错误,D正确;
B、同一种限属制酶切割不同的DNA产生的黏性末端相同,能够很好地进行碱基配对,B正确.
故选:C.
C. 两种不同的DNA限制酶切割为何会形成相同的黏性末端如何判断两种限制酶切割是否会形成相同的黏性末端
识别的位点相同就可以了,而产生相同的碱基序列就是判断是否能形成粘性末端的依据
D. 这限制酶切割转到DNA双螺旋结构上是怎么切割的
其实DNA双螺旋结构只是具体的表现形体,我们在细化时首先要重点关注一专下限制酶的切割远离属,它是有特异性识别位点,然后水解碱基之间的3',5'磷酸二酯键。
我们平时所说的序列一般都是对核苷酸的简称,比如ATGC,从图片上来看,也就是碱基配对的部位,可以理解为限制酶的识别位点,水解之后再水解碱基互补中的氢键。
E. 限制性内切酶如何切割,外源DNA怎么连上去
这一过程需借助两种酶:限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
限制性核酸内专切酶是可以识别特定的脱属氧核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。
DNA连接酶利用NAD或ATP中的能量催化两个核酸链之间形成磷酸二酯键。反应过程可分三步:
(1)NAD+或ATP将其腺苷酰基转移到DNA连接酶的一个赖氨酸残基的ε─氨基上形成共价的酶-腺苷酸中间物,同时释放出烟酰胺单核苷酸(NMN)或焦磷酸。
(2)将酶-腺苷酸中间物上的腺苷酰基再转移到DNA的5'-磷酸基端,形成一个焦磷酰衍生物,即DNA-腺苷酸;
(3)这个被激活的5'-磷酰基端可以和DNA的3'-OH端反应合成磷酸二酯键,同时释放出AMP。
F. 可以通过什么办法防止限制性内切核酸酶切割后的dna自身环化
Ⅰ(1)质粒分子经SmaⅠ切割前,为环状DNA,无游离磷酸基团;切割后,会断裂2个脱氧核苷酸(CG)之间的磷酸二酯键,露出2个游离磷酸基团.(2)插入的SmaⅠ酶切位点越多,碱基对CG越多,氢键越多,故质粒的热稳定性越高.(3)只使用EcoRI,质粒、外源DNA自身都只含有1对互补黏性末端,自身会发生连接成为环状DNA,不利目的基因导入.故使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA,各自会有不同黏性末端,能防止自身环化.Ⅱ.原核生物(如大肠杆菌)是基因工程中较理想的受体细胞,具有一些其他生物没有的特点:①繁殖快,能大量快速复制DNA;②多为单细胞,结构简单,容易操作;③遗传物质相对较少,不易对目的基因干扰.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:首先用Ca2+处理细胞,使之成为感受态细胞,然后完成转化.Ⅲ.植物基因工程中将目的基因导入受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法.且一般将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中形成重组Ti质粒,这样可将目的基因整合到受体细胞的染色体上.移植入的目的基因为单个,故转基因植株一般为杂合子.要避免基因污染,一般需将目的基因导入植物细胞的细胞质(线粒体、叶绿体),不会随着花粉进行基因污染.故答案为:Ⅰ.(1)0 2 (2)高 (3)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化Ⅱ.③遗传物质相对较少 Ca2+ 感受态Ⅲ.农杆菌转化法 T-DNA 杂合 细胞质(线粒体、叶绿体)
G. 限制酶怎么切割目的基因图解
因为要获得一个目的基因,需将此目的基因两边多余的脱氧核苷酸切除掉,因此有两个切口,又DNA分子是双链的,所以有4个磷酸二酯键被切.
H. dna分子经限制酶切割产生的dna片段末端通常用的两种方式是哪两种
简单来说,限制性内切酶识别DNA序列中的回文序列。有些酶的切割位点在回文版的一侧(如EcoR I、BamH I、Hind等)权,因而可形成粘性末端,另一些Ⅱ类酶如Alu I、BsuR I、Bal I、Hal Ⅲ、HPa I、Sma I等,切割位点在回文序列中间,形成平整末端。
I. 为什么原核生物的限制酶不切割自己的DNA
在长期的进化过程中原核生物形成了一套完善的防御机制,以保持自身遗专传的相对稳定性.当外源DNA侵入后属,限制酶就将其切割掉,使外源DNA不能发挥遗传效应,而且限制酶往往与一种甲基化酶同时成对存在,它们具有相同的底物专一性,具有识别相同碱基序列能力.甲基化酶的甲基供体为S-腺苷甲硫氨酸,甲基受体为DNA上的腺嘌呤与胞嘧啶.当限制酶作用位点上的某一些碱基被甲基化修饰后,限制酶就不能再降解这种DNA了.这样在含有某种限制酶的原核生物的细胞中,其DNA分子中不具备这种限制酶的识别切割序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开.所以限制酶只降解外源入侵的异种DNA,而不分解自身DNA
J. 限制酶怎样切割DNA序列主要是在DNA的哪部分分割切割时遵循哪些守则
限制酶会识别特定的DNA序列,没有特定的哪一部分,就是哪有它要识别的序列它就会切哪。
而粘性末端不是限制酶切的地方,而是限制酶切完之后的DNA的端口叫做粘性末端。