基因工程质粒怎么被切割
㈠ 基因工程中被同一限制酶切割的目的基因和质粒片段是相同的吗如果是
限制性内切酶是识别特定的核苷酸序列、然后对这段序列进行切割的一种酶。不同内的限制性内切酶识别的核苷容酸序列不同,切的方式也不同。
比如说 Alu I这种限制性内切酶识别AGCT的双链,然后在G和C之间进行切割,位点如下:
5'-A G^C T-3'
3'-T C^G A-5'
切割之后的形成一个平末端。
而Hind Ⅲ这种限制性内切酶识别位点是:AAGCTT,
切割后的片段具有黏性末端
所以说,在基因工程中被同一限制性内切酶酶切割,只需要都包含有这个限制性内切酶的识别位点就行了,其它的序列可以是不同的。
㈡ 基因工程中用限制酶切割质粒,是切断而已,没有切除掉一小片段吧
限制酶切割质抄粒的原理是根据限制酶的作用位点决定的
1.单一的限制性内切酶来说,它只有一个识别位点,作用于质粒时,在识别位点将质粒切断,形成线性化质粒,此时只是切断,并没有丢失序列,通过琼脂糖凝胶电泳可以非常明显的看到剪切前后的区别。
2.当然还有个别的能识别多个位点的限制酶,或者多个限制酶共同作用,这时切断的序列就变成了两段独立的序列,通过琼脂糖凝胶很容易就看到一大一下两端序列。
㈢ 请问基因工程里限制酶切质粒需要切几次
在高中生物里只用一种限制酶的情况下,目的基因切两次,质粒切一次。
实际操作中,内由于容种种条件限制,往往需要用到两种限制酶识别两种切割位点,所以是各切两次。不管怎么切,保证切完后目的基因两端的识别位点和质粒切口两端相同即可。
㈣ 高二生物 基因工程 目的基因和质粒是否要用同一限制酶进行切割
目的基因和质粒要[同时]用同一种限制性核酸内切酶切割,不然就没法连了专。但最好用属不同的限制酶切两端(切目的基因是不是应该切两下么),防止载体自连或目的基因自连。
啊啊,这道题。这题是这样的,你仔细看一下质粒,若用酶2切,那质粒两处酶切位点都要断,所以质粒只能用酶1切,保证其只有一个缺口。然后目的基因则只能用酶2切,这样两端才都能切下来。(若用酶1的话目的基因右端是切不了的)
希望能帮到你。
㈤ 基因工程中,为什么切质粒和切目的基因要
基因工程中,为什么切质粒和切目的基因要
使用方法同种酶,为了使质粒和目的基因的切口形成相同(或者说互补也可以)的碱基序列,才能让目的基因嵌入质粒中
㈥ 生物的基因工程中,目的基因为什么有两个切口,而质粒只有一个切口
目的基因有两个切口是为了把目的基因切下来,而质粒上一个切口是为了切出一个让目的基因插入的点,不过,一般情况下质粒和目的基因是同时用两个不同的限制酶切割,所以一般都是两个切口
㈦ 基因工程中切割载体和含目的基因的DNA片段是需使用同种限制酶是为什么是怎么切割怎么连的,能不能简述
所用的同种限制酶是限制性内切酶,也叫做内切酶,至于具体用哪回个内切酶,要根据答你要切的序列进行分析,分析的软件很多,比如OMIGA,MEGA,primer premier......
至于怎么切割怎么连,下面已经说的很清楚了,简说,就是识别-切割-连接。
基因工程的主要步骤:
1.目的片段的分离与合成,获得目的片段
2.目的片段与载体连接(载体有两种,一种叫做克隆载体,为了大量获得该片段,并对在片段在基因层面进行研究;另一种叫做表达载体,为了将目的片段翻译成蛋白,对蛋白进行研究);
3.含有目的片段的载体导入宿主细胞内
4.对宿主进行检测和筛选,主要检测是否导入成功,和导入的基因是否你所要的;
㈧ 质粒被切下来的DNA片段去哪了
质粒上被切下来的DNA片段段会在溶液中游离着,因为切除掉的DNA片段过于短,在胶回收的时候也容易丢失。但是,如果载体做过去磷酸化处理,那么在后续目的基因和载体的连接反应中就完全不会有影响的。
打字不易,望采纳。
㈨ “基因工程中切割目的基因和质粒的限制酶可以不同.”为什么
不同的酶不一定具有不同的黏性末端,只要是有相同的切割末端就可以用来切割目的基因和质粒的限制酶
㈩ 基因工程操作中,用的三个限制酶(一个切割质粒,两个切割目的基因)都可以不同吗,也就是可以是三种吗
标题的理解不来对。
限制自酶切基因的目的是为了露出相匹配的单链末端,即切割后目的基因的一个末端会和质粒的末端相匹配,就可以连起来,而为了获得相匹配的末端则需要同一种限制酶。
所以,如果用一个限制酶切质粒的话,目的基因的两端都要和质粒末端相匹配,切目的基因的限制酶也是那一个,就是一种限制酶。
如果用两个限制酶切质粒的话,目的片段的两端分别是2种相匹配的,需要用2种限制酶切。就是总共2种限制酶。不存在标题的情况。