不同酶切位点用什么酶来切割
1. 平末端酶切位点有哪些怎样判断酶切位点是粘性末端还是平末端
怎样判断酶切位点是粘性末端还是平末端
用限制酶切割后得到的末端齐平就专是平末端,一长一短就是粘属性末端
根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切.所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端.交错切就是限制性内切酶在DNA双链的不同位置切割DNA,产生的DNA片段的末端不是平齐的
2. 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题
（1）由图可知，质粒是环状的，切割前没有游离的磷酸基团，质粒中有一个SmaⅠ酶切割位点，所以切割后有两个游离的磷酸基团．
（2）DNA分子中C与G之间有三个氢键，A与T之间有两个氢键，所以C与G含量越多，热稳定性越高，由图可知，SmaⅠ酶切位点的配对方式是C与G配对．
（3）由图可知，目的基因和标记基因中都有SmaⅠ酶切割序列，如用SmaⅠ酶会破坏目的基因和标记基因．
（4）如只使用EcoRⅠ酶切割，会形成相同的黏性末端，可能出现质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化．
（5）DNA连接酶可将目的基因与质粒连接起来形成重组DNA．
（6）重组质粒中抗生素抗性基因是标记基因，作用是为了鉴别和筛选含有目的基因的细胞．
（7）大肠杆菌丧失吸收蔗糖能力，导入蔗糖转运蛋白基因后可恢复吸收蔗糖能力，所以在以蔗糖为唯一含碳营养物质的培养基中培养，可筛选出需要的表达成功的大肠杆菌．
（8）制备cDNA探针时，需提取、分离mRNA作用为模板，在逆转录酶的催化下合成cDNA探针．
（9）基因工程中，切割含有目的基因的DNA片段和载体时用同种限制酶．并用显微注射法导入受精卵中，再利用SRY探针 （Y染色体上的性别决定基因）进行检测，将检测反应呈阴性的胚胎进行移植培养．
故答案为：
（1）0、2
（2）高
（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
（5）DNA连接
（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞
（7）蔗糖为唯一含碳营养物质
（8）mRNA 逆转录酶
（9）同种限制酶 显微注射 受精卵 阴性
3. 相同的识别序列不同的酶切位点
选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的启动子丢失，因此只能选BclI和HindⅢ两种限制酶切割．
故选：B．
4. 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题
（1）质粒是环状DNA分子，不含游离的磷酸基团；外源DNA分子的每一条链都含有一个游离的磷酸基团，因此共含有2个游离的磷酸基团．
（2）DNA分子中，C与G之间有三个氢键，A与T之间有两个氢键，所以C与G含量越多，DNA分子的热稳定性越高．由表中信息可知，SmaⅠ的识别序列为CCCGGG，酶切位点在C与G之间，因此插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性将越高．
（3）用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒时，会导致目的基因与抗性基因被破坏，因此不能用SmaⅠ构建重组质粒．
（4）BamHⅠ和HinRⅢ两种限制酶切割产生的黏性末端不同，若用这两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，再用DNA连接酶连接两者时，可避免切割的外源DNA、质粒的粘性末端自身环化．
（5）将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶．
（6）重组质粒中抗生素基因的作用是鉴别和筛选含有目的基因的细胞．
故答案为：
（1）0、2
（2）高
（3）SmaⅠ
（4）BamHⅠ、HindⅢ
（5）DNA连接
（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞
5. 不同种类的限制酶切割位点一定不同吗相同的黏性末端一定是由相同的限制酶切出的吗关于这一块麻烦详细
一种限制酶可能可以识别多种酶切位点，所以有可能不同酶切出的末端是相同的。具体是哪些酶我忘了，去年做题的时候见到过
6. 如何给一段序列增加一个酶切位点。
你可以设计带有酶切位点的引物，对目的基因进行PCR，就可在目的基因上引入酶切位版点。
步骤：引物设权计（借助软件）——合成引物（公司合成）——PCR。
最重要的一个仪器就是PCR仪了，具体的加什么试剂，加多少，我想楼主应该是做分子生物学，这些应该挺清楚的了。
楼主，引物一般是用软件设计，例如Primer.5，你根据你的目的基因两端的特点，设计合适的引物，然后在引物上再添加酶切位点 ，例如EcoRⅠ 是应用最广泛的限制性内切酶，酶切位点和切割位点如下： 5' G↓AATTC 3' 3' CTTAA↑G 5' ，你就可以在这两条引物上分别添加这几个脱氧核苷酸，这不就在引物中引入酶切位点了吗？经过PCR后引物和目的基因连在一起，酶切位点自然也连上去了。楼主，你可以根据需要，引入不同的限制性内切酶的酶切位点。
7. 两种不同的DNA限制酶切割为何会形成相同的黏性末端如何判断两种限制酶切割是否会形成相同的黏性末端
识别的位点相同就可以了，而产生相同的碱基序列就是判断是否能形成粘性末端的依据