运载体用什么切割
㈠ 1.将目的基因和运载体连接起来需要哪些工具对限制酶的原则上的要求是什么
基因工程中,构建基因表达载体时,首先用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,以产生相同的黏性末端,其次再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子.
故选:B.
㈡ 切割运载体和目的基因往往是用同一种限制酶还是两种
往往是一种。不过我看为了准确,两种更好一点。用同一种的话,可能会自身环化
㈢ 运载体要具备的条件 有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,给解释一下最后一句
每种酶的切点最好只有一个才能保证质粒的完整性,使质粒不损失基因片段,不会丧失某些特定功能。
㈣ 限制酶怎样切运载体只是剪开一个口,还是剪下一部分
在特定的识别位点切开一个口(DNA上磷酸二酯键),形成两个末端
㈤ 关于运载体的问题
限制酶的切点就是两个末端断裂的那个地方,也可以是平末端,不一定是黏性版末端。
载体有多个限权制性核酸内切酶切点,切点有多种,可以使用的酶也就有多种,但每种酶的切点最好只有一个。若用于切割载体的限制酶有多个切点,则切割后载体可能丢失含有复制起点的片段,重组DNA分子进入受体细胞后便不能进行自主复制。切点所处位置必须在载体本身需要的基因片段外,避免载体因目的基因的插入而失活。
㈥ 将目的基因和运载体连接起来需要哪些工具
限制酶 DNA连接酶 同一种限制酶
㈦ 目的基因和运载体不是应该用同种限制酶切割的吗为什么这个题用不同种
目的基因和运载体不是应该用同种限制酶切割的
A、限制性内切酶能够识内别双链DNA分子的某容种特定核苷酸序列,并且切割形成特定的粘性末端,A正确;
B、真核生物基因有编码区和非编码区之分,并且编码区包括外显子和内含子,而以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因只包含外显子,没有内含子和非编码序列,因此与原基因的碱基序列不同,故B错误;
C、目的基因在受体细胞中成功表达才表示基因工程操作成功,仅仅检测到受体细胞含有目的基因,并不代表该基因可以正常的转录和翻译,故C错误;
D、质粒中抗生素抗性基因一般用于检测目的基因是否成功导入受体细胞中,故D错误.
㈧ 在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因,为什么
质粒是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线;然后你再从一长串专DNA上切下你要的目的片段,属用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了。
由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做。。。
㈨ 在进行某项基因工程时,假设以大肠杆菌质粒作为运载体,用同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因,将切
用同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因可形成相同的黏性末端,将切割回后的运载体与目的基因片段答混合,并加入DNA连接酶,若只考虑由两个片段连接形成的环状DNA分子,其种类有3种,即目的基因与目的基因连接形成环状DNA分子、目的基因与运载体连接形成环状DNA分子、运载体与运载体连接形成环状DNA分子.
故选:C.
㈩ 基因工程的运载体
首先说明运载体中是肯定没有目的基因的。
请注意,限制酶并没有“切断”目专的基因,而是“属切下”,目的基因必须要完整。
限制酶在切割目的基因时切下的是一段包含目的基因的核苷酸序列。
打个比方,假设有一段序列是1,2,3,4,5,而目的基因是3,那么切的一般就是2,3,4,目的基因两头都会多出一些。
再者,限制酶的转移性针对的是一个核苷酸序列,而不是基因。它所识别的序列,不仅在目的基因旁边有,在运载体上有,甚至可能在人体内也有,因为它只是少数几个核苷酸的固定排序。
希望对你有帮助。