用一定的什么切割质粒

『壹』 切割质粒和含目的基因的外源DNA必须用同一种限制酶,这句话对吗

不对,因为太绝对!一般情况下是用同一种限制性内切酶,这样暴露同样的黏性末端,然后用DNA连接酶进行连接.但是也存在不同的限制性内切酶切割形成相同的黏性末端.

『贰』 在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因，为什么

质粒是一个闭合的DNA圆圈，你得先切开它，把它切成一条线；然后你再从一长串专DNA上切下你要的目的片段，属用连接酶像胶水一样，吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了，但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了。

由于载体质粒只有圆圈状才有活性，才有用，所以你必须这么做。。。

『叁』 在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因,为什么

质粒是一个闭合的抄DNA圆圈袭,你得先切开它,把它切成一条线；然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了.
由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做.

『肆』 切割质粒的酶是什么

质粒中有两个抗性基因，一个是四环素抗性基因和氨卞青霉素抗性基因，如果用酶1来切内会破坏两容个抗性基因，同时把质粒切成两个片段，所以只能选用酶2，切开一个切口，便于目的基因的插入。同理，目的基因需要用酶1，左右各形成一个切口，这样才能切下一个目的基因。

『伍』 中什么切割质粒什么切割目的基因，为什

降低了环化可能。
如果切割位点为A-B-B之流，
那仍旧可能自发环化。
但位点由我们选择，
可以规避以上情况。

『陆』 剪切目的基因所用的限制酶与切割质粒所用限制酶一定要相同吗

一定要相同.
只有用同一种限制酶剪切目的基因和切割质粒,才能暴露相同的黏性末端或平末端,便于DNA连接酶的拼接

『柒』 最好用哪种酶切割质粒，用哪种酶切割目的基因所在DNA

两种酶同时处理 这样不会出现三种产物 不会环化 容易得到产物 避免筛选与检测

『捌』 用两种限制酶去切割质粒,质粒就被切割成2段了,质粒不就被破坏了吗 最好用图说明!

只要目的基因同样用这两种限制酶切割,再用DNA连接酶连接起来,形成重组质粒就好了,不会被破坏.

『玖』 用来切割质粒和目的基因的酶是否必须为同一种酶为什么

用来切割质粒和目的基因的酶是否必须为同一种酶？为什么
这个是不一定的。要专看具体题目，由属于DNA连接酶连接的黏性末端互补，所以只要两种酶产生的黏性末端互补（相同），所以再用DNA连接酶就可以（PS：虽然两种酶识别序列不一样，但是可能产生互补的黏性末端）。你会见到这样的题目的

『拾』 基因工程操作中，用的三个限制酶(一个切割质粒，两个切割目的基因)都可以不同吗，也就是可以是三种吗

标题的理解不来对。
限制自酶切基因的目的是为了露出相匹配的单链末端，即切割后目的基因的一个末端会和质粒的末端相匹配，就可以连起来，而为了获得相匹配的末端则需要同一种限制酶。
所以，如果用一个限制酶切质粒的话，目的基因的两端都要和质粒末端相匹配，切目的基因的限制酶也是那一个，就是一种限制酶。
如果用两个限制酶切质粒的话，目的片段的两端分别是2种相匹配的，需要用2种限制酶切。就是总共2种限制酶。不存在标题的情况。