大腸桿菌生產胰島素如何加工

『壹』 用大腸桿菌生產人的胰島素的詳細步驟

大腸桿菌產生胰島素並進行批量生產的原理是運用到了現代生物技術的轉基因技術，它是先將人胰島素基因從人的染色體上分離出來，插入從細菌細胞中提取出來的質粒(一種小圓環狀DNA)中，再將這個合並起來的、帶有胰島素基因的質粒，轉移入大腸桿菌的細胞中，隨後該胰島素基因會指導大腸桿菌細胞產生胰島素，人類即可將這些胰島素提取並收集出來，用於治療糖尿病病人。

那麼如何利用大腸桿菌生產胰島素 呢？下面從基因工程角度說一下。

1.提取目的基因:
既從人的DNA中提取胰島素基因,可使用限制性內切酶將目的基因從原DNA中分離.
2.提取質粒:
使用細胞工程,培養大腸桿菌,從大腸桿菌的細胞質中提取質粒,質粒為環狀.
3.基因重組:
取出目的基因與質粒,先利用同種限制性內切酶將質粒切開,再使用DNA連接酶將目的基因與質粒"縫合",形成一個能表達出胰島素的DNA質粒.
4.將質粒送回大腸桿菌:
再大腸桿菌的培養液中加入含有Ca+的物質,如CaCl2,這使細胞會吸收外源基因.此時將重組的質粒也放入培養液中,大腸桿菌便會將重組質粒吸收.
5.胰島素的產生:
再大腸桿菌內,質粒通過表達轉錄與翻譯後,便產生出胰島素蛋白質.通過大腸桿菌的大量繁衍,便可大量生產出胰島素!

『貳』 有關大腸桿菌產胰島素的問題

腸桿菌是原核生物，只有核糖體，只能形成多肽（肽鏈）。而胰島素是蛋白質，它的合成是需要內質網和高爾基體的加工。所以，利用大腸桿菌等微生物表達生產胰島素的過程中，表達產物常常形成包涵體，而不是分泌出來。要通過變性和復性過程才能得到有活性的人胰島素。
通過基因工程，將人胰島素基因A、B鏈的人工合成基因分別組合到大腸桿菌的不同質粒上，然後再移至菌體內，這種重組質粒在大腸桿菌細胞內進行正常的復制和表達，從而使帶有A、B鏈基因的工程菌株分別產生人胰島素A、B鏈，然後再用人工的方法，在體外通過二硫鍵使這2條鏈連接成有活性的人胰島素。現在大都已經改為用酵母菌、昆蟲培養細胞、或哺乳動物培養細胞等真核細胞作為表達載體，可以直接分泌胰島素，而少用大腸桿菌。

『叄』 大腸桿菌怎樣合成胰島素

你好！
將合成胰島素的基因與大腸桿菌的基因結合
大腸桿菌就會分泌胰島素
如有疑問，請追問。

『肆』 如何利用大腸桿菌生產胰島素 從基因工程角度說一下吧

生物製法：首先剪切胰島素基因，再將胰島素基因轉入人的大腸桿菌內，再創造大版腸桿菌裂殖的權有利環境，對大腸桿菌進行大規模培養，使之產生大量的治療糖尿病的葯物——胰島素。
基因製法: 在基因工程人胰島素的生產過程中,一般是先表達胰島素原,然後對胰島素原復性,復性後的胰島素原通過酶切得到有活性的胰島素.其中胰島素原的復性效率是決定最終收率的關鍵因素,正確折疊與錯誤折益胰島素原的分子量完全相同,結構非常相似,採用RT-HPLC可對其進行分離檢定.Sergeev等利用反相色譜建立了復性液中胰島素原的檢測方法.如果要對正確折疊與錯誤折盛胰島素原的結構進一步說明,可將其用蛋白酶V8酶解,然後用RP-HPLC-MS作膚圖譜.Damn等用S.aureus protease V8酶解胰島素原,然後用R'FHPLC做肚譜圖,並結合質譜法對重組胰島素原的折受過程進行了監測.

『伍』 為什麼大腸桿菌可以生產胰島素

正常胰島素是由胰島素原酶切後，成兩條鏈。
將人胰島素基因A、B鏈的人工合成基因分別組合到回答E.coli的不同質粒上，然後再移至菌體內，著種重組質粒在E.coli細胞內進行正常的復制和表達，從而使帶有A、B鏈基因的工程菌株分別產生人胰島素A、B鏈，然後再用人工的方法，在體外通過二硫鍵使這2條鏈連接成有活性的人胰島素。

『陸』 如何利用細菌生產胰島素

1977年，抄美國科學家尤爾利奇和古襲德曼，從科恩和博耶成功的實驗中得到啟發，決定用重組基因的方法試一試，看用這種方法是否可以使大腸桿菌生產出胰島素來。他倆先將小鼠生產胰島素的基因分離出來，轉移到大腸桿菌中去，雖然沒有獲得表達，但轉移的成功為今後利用細菌生產人胰島素邁出了重要的一步。

1978年9月，美國加利福尼亞大學科學家板侖等人，首先將產生人胰島素的基因分離出來，把基因拼接到大腸桿菌的質粒上去，這些帶著人胰島素基因的質粒，進入大腸桿菌內，人胰島素基因竟能夠操縱大腸桿菌生產人胰島素。由於大腸桿菌繁殖快，每繁殖一代只需30～40分鍾，從1000升的培養液里就能提取100克人胰島素，使人們通過細菌來獲得大量的胰島素作為葯物的構想成為可能。這是從細菌獲得葯物的一個成功例子。

『柒』 大腸桿菌是怎樣生產胰島素的

天然抄的大腸桿菌不產生任襲何的胰島素，，後來人們經過基因改造後，，其過程如下：

基因工程將人的胰島素基因導入大腸桿菌中理論上需要4步
1.胰島素基因的獲取 可以從基因文庫中獲取，利用PCR技術擴增胰島素基因，也可以通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成。（可以用限制性核酸內切酶獲取胰島素基因）

2.基因表達載體的構建 這一步是基因工程的核心，需要目的基因即胰島素基因，標記基因，啟動子和終止子。（一般用質粒作為運載體）

3.胰島素基因的導入 有三種方法，農桿菌轉化法，基因槍法，花粉管通道法，顯微注射等方法。

4.胰島素基因的檢測與鑒定 上面提到有標記基因，方便檢測。檢測分3步，第一，檢測DNA（基因探針）。第二，檢測mRNA。第三，檢測是否合成胰島素。

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『捌』 利用大腸桿菌發酵生產人胰島素的原理

腸桿菌是原核復生物，只有核糖體，制只能形成多肽（肽鏈）。而胰島素是蛋白質，它的合成是需要內質網和高爾基體的加工。所以，利用大腸桿菌等微生物表達生產胰島素的過程中，表達產物常常形成包涵體，而不是分泌出來。要通過變性和復性過程才能得到有活性的人胰島素。
通過基因工程，將人胰島素基因a、b鏈的人工合成基因分別組合到大腸桿菌的不同質粒上，然後再移至菌體內，這種重組質粒在大腸桿菌細胞內進行正常的復制和表達，從而使帶有a、b鏈基因的工程菌株分別產生人胰島素a、b鏈，然後再用人工的方法，在體外通過二硫鍵使這2條鏈連接成有活性的人胰島素。現在大都已經改為用酵母菌、昆蟲培養細胞、或哺乳動物培養細胞等真核細胞作為表達載體，可以直接分泌胰島素，而少用大腸桿菌。

『玖』 大腸桿菌生產胰島素

因為大抄腸桿菌是原核生襲物，是單細胞生物，所以用大腸桿菌生產胰島素時，只用了基因工程、發酵工程和酶工程。
用到基因工程，是用了基因重組技術，即把人類的控制胰島素合成的基因用化學方法切割下來，再植入到大腸桿菌的DNA中，形成一個重組DNA分子，利用大腸桿菌的繁殖和生長，在大腸桿菌細胞體內合成出人胰島素。
既然是利用細菌生產葯物，肯定要用到發酵工程，不然如不讓大腸桿菌大量繁殖，就得不到工業產量的葯品。
在切割以及重組DNA時，必須用到一系列酶，所以需要用到酶工程。

『拾』 用基因工程大腸桿菌怎麼可能生產胰島素

雖然沒有細胞器，但是原核生物的細胞內含有合成蛋白質所需的酶系，只是都包含在細胞質中，有的貼附在細胞膜上，只要將質粒轉化入大腸桿菌，這些酶可以完成蛋白質的合成