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多肽在哪裡進行加工

發布時間: 2021-02-15 18:41:11

A. 多肽合成方法有哪些

多肽合成方法:

  1. 醯基疊氮物法

    早在1902年,TheodorCurtius就將醯基疊氮物法引入到肽化學中,因此它是最古老的縮合方法之一。在鹼性水溶液中,除了與醯基疊氨縮合的游離氨基酸和肽以外,氨基酸酯可用於有機溶劑中。與其他許多縮合方法不同的是,它不需要增加輔助鹼或另一等當量的氨基組分來捕獲腙酸。

    長期以來,一直認為疊氮物法是唯一不發生消旋的縮合方法,隨著可選擇性裂解的氨基酸保護基引入,該方法經歷了一次大規模的復興。該方法的起始原料分別是晶體狀的氨基酸醯肼或肽醯肼64,通過肼解相應的酯很容易得到。在-10℃的鹽酸中,用等當量的亞硝酸鈉使醯肼發生亞硝化而轉化為疊氮化物65,依次洗滌、乾燥,然後與相應的氨基組分反應。有些疊氮化物可用冰水稀釋而沉澱出來。 二苯磷醯基疊氮化物(DPPA)也可以用於醯基疊氮化物的合成。Honzl-Rudinger方法採用亞硝酸叔丁作為亞硝化試劑,並且使疊氮縮合反應可在有機溶劑中進行。因醯基疊氮化物的熱不穩定性,縮合反應需在低溫下進行。當溫度較高時,Curtius重排,即醯基疊氮轉化為異氰酸酯的反應成為一個主要的副反應,最終導致生成副產物脲。由於反應溫度低(如4℃)而導致反應速率相當慢,使得肽縮合反應通常需要幾天才能完全。 對於較長的N端保護的肽鏈,酯基的肼解一般比較困難,因此,使用正交的N保護肼衍生物是一種選擇。在肼基的選擇性脫除後,按倒接(backing-off)策略組合的肽片段可以用於疊氮縮合。

    如前所述,雖然疊氮法一直被認為是消旋化傾向最小的縮合方法,但在反應中,過量的鹼會誘發相當大的消旋。因此,在縮合反應期間要避免與鹼接觸,例如,氨基組分的銨鹽應採用N,N-二異丙胺或N-烷基嗎啉代替三乙胺來中和。

    雖然有上述局限性,但該方法仍很重要,尤其對於片段縮合而言,因為該方法具有較低的異構化傾向,適用於羥基未保護絲氨酸或蘇氨酸組分時,Nˊ保護的本行醯肼還具有多種用途。

  2. 酸酐法

    在多肽合成中,最初考慮應用酸酐要追溯到1881年TheodorCurtius對苯甲醯基氨基乙酸合成的早期研究。從氨基乙酸銀與苯甲醯氯的反應中,除獲得苯甲醯氨基乙酸外,還得到了BZ-Glyn-OH(n=2-6)。早期曾認為,當用苯甲醯氯處理時,N-苯甲醯基氨基酸或N-苯甲醯基肽與苯甲酸形成了活性中間體不對稱酸酐。 大約在70年後,TheodorWieland利用這些發現將混合酸酐法用於現代多肽合成。目前,除該方法外,對稱酸酐以及由氨基酸的羧基和氨基甲酸在分子內形成的N-羧基內酸酐(NCA,Leuchsanhydrides)也用肽縮合。最後應該提到,不對稱酸酐常常參與生化反應中的醯化反應。

  3. 混合酸酐法

    有機羧酸和無機酸皆可用於混合酸酐的形成。然而,僅有幾個得到了廣泛的實際應用,多數情況下,採用氯甲酸烷基酯。過去頻繁使用的氯甲酸乙酯,目前主要被氯甲酸異丁酯所替代。

    由羧基組分和氯甲酸酯起始形成的混合酸酐,其氨解反應的區域選擇性依賴依賴於兩個互相競爭的羰基的親電性和(或)空間位阻。在由N保護的氨基酸羧酸鹽(羧基組分)和氯甲酸烷基酯(活化組分,例如源於氯甲酸烷基酯)形成混合酸酐時,親核試劑胺主要進攻氨基酸組分的羧基,形成預期的肽衍生物,並且釋放出遊離酸形式的活性成分。當應用氯甲酸烷基酯(R1=異丁基、乙基等)時,游離的單烷基碳酸不穩定,立即分解為二氧化碳和相應的醇。然而,對於親核進攻的區域選擇性,也有一些相反的報道,產物為氨基甲酸酯和原來的N保護氨基酸組分。 為了形成混合酸酐,將N保護的氨基酸或肽分別溶於二氯甲烷、四氫呋喃、二氧六環、乙腈、乙酸乙酯或DMF中,用等當量的三級鹼(N-甲基哌啶、N-甲基嗎啉、N-乙基嗎啉等)處理。然後,在-15℃--5℃,劇烈攪拌的同時加入氯甲酸烷基酯以形成不對稱酸酐(活化)。經短時間活化後,加入親核性氨基酸組分。如果作為銨鹽使用(需要更多的鹼),必須避免鹼的過量使用。如果嚴格按照以上的反應條件,混合酸酐法很容易進行,是最有效的縮合方法之一。

  4. 對稱酸酐法

    Nα-醯基氨基酸的對稱酸酐是用於肽鍵形成的高活性中間體。與混合酸酐法相反,它與胺親核試劑的反應沒有模稜兩可的區域選擇性。但肽縮合產率最高,為50%(以羧基組分計)。

    雖然由對稱酸酐氨解形成的游離Nα-醯基氨基酸可以和目標肽一起,通過飽和碳酸氫鈉溶液萃取回收,但在最初,這種方法的實用價值極低。對稱酸酐可以用Nα-保護氨基酸與光氣,或方便的碳二亞胺反應製得。兩當量的Nα-保護氨基酸與-當量的碳二亞胺反應有利於對稱酸酐的形成,對稱酸酐可以分離出來,也可不經純化而直接用於後面的縮合反應。基於Nα-烷氧羰基氨基酸的對稱酸酐對水解穩定,可採用類似上述純化混合酸酐的方法進行純化。

    由於Boc-保護氨基酸的商品化和合理的價格,在肽鏈的逐步延長中,使用對稱酸酐法日益受到重視。雖然可以買到晶狀的對稱酸酐,但原位制備仍然是一種不錯的選擇。

  5. 碳二亞胺法

    碳二亞胺類化合物可用於氨基和羧基的縮合。在該類化合物中N,Nˊ-二環己基碳二亞胺(DCC)相對便宜,而且可溶於肽合成常用的溶劑。在肽鍵形成期間,碳二亞胺轉變為相應的脲衍生物,N,Nˊ-二環己基脲可以從反應液中沉澱出來。顯然,碳二亞胺活化後的活性中間體氨解和水解速率不同,使肽合成能在含水介質進行。經幾個課題組的大量研究,確立了以碳二亞胺為縮合劑的肽縮合反應機理,羧酸根離子加成到質子化的碳二亞胺,形成高活性的O-醯基脲;雖然還沒有分離出這個中間體,但通過非常類似的穩定化合物推斷了它的存在。O-醯基脲與氨基組分反應,產生被保護的肽和脲衍生物。或者,與質子化形式處於處於平衡狀態的O-醯基異脲,被第二個羧酸酯親核進攻,產生對稱的氨基酸酐和N,Nˊ-二取代脲。前者與氨基酸反應得到肽衍生物和游離氨基酸。在鹼催化下,使用DCC的副反應使醯基從異脲氧原子向氮原子轉移,產生N-醯基脲71,它不再發生進一步的氨解。不僅過量的鹼可催化O-N的醯基轉移,而且鹼性的氨基組分或碳二亞胺也可催化該副反應。

    另外,極性溶劑有利於這一反應途徑。

B. 多肽進入溶酶體為什麼會變成酶。難道不需要多肽進行加工

多肽由核糖體合成,然後多肽進入內置網和高爾基體進行加工分類,形成具有一定的空間結構的蛋白質,酶大部分屬於蛋白質。有小部分是RNA,RNA由細胞核的核仁合成,並通過核孔排出進入細胞質。

C. 植物體內RNA的合成在哪裡進行 多肽的合成在哪裡進行 急急急!!!

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E. 多肽合成方法有什麼

現在,人們已經發現和分離出一百多種存在於人體的肽,對於多肽的研專究和利用,出現了屬一個空前的繁榮景象。多肽的全合成不僅具有很重要的理論意義,而且具有重要的應用價值。通過多肽全合成可以驗證一個新的多肽的結構;設計新的多肽,用於研究結構域功能的關系;為多肽生物合成反應機制提供重要的信息;建立模型酶以及合成新的多肽葯物等。

二、合成方法

多肽的合成主要有兩種途徑:化學合成和生物合成。化學合成主要通過氨基酸縮合反應來實現。為得到具有特定順序的合成多肽,當合成原料中含有官能度大於2的氨基酸單體時,應將不需要反應的基團暫時保護起來,然後再進行連接反應,以保證合成的定向進行。多肽的化學合成有固相合成和液相合成,其主要的區別在於是否使用固相載體。多肽液相合成主要有逐步合成和片段組合兩種策略,

F. 肽鏈剪切在什麼細胞器內進行

分泌蛋白,膜蛋白及細胞器駐留蛋白的剪切基本上都是在內質網內,高爾基體內回一般不做剪切修飾。答
在基質中合成的蛋白質在基質內剪切。如果在基質內合成的蛋白是線粒體或葉綠體蛋白,其上的導肽或轉運肽會在線粒體或葉綠體內切除。

G. 多肽合成是什麼技術

多肽合成又叫肽鏈合成,是一個固相合成次第普通從N端(氨基端)向C端(羧基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中中止的稱為液相合成法。多肽的合成主要分為兩條途徑:化學合成多肽和生物合成多肽。

多肽合成的原理

多肽合成就是如何把各種氨基酸單位按照自然物的氨基酸排列次第和銜接方式銜接起來。由於氨基酸在中性條件下是以分子內的兩性離子方式(H3+NCH(R)COO-)存在,因此,氨基酸之間直接縮合構成醯胺鍵的反響在普通條件下是難於中止的。

由此所得的銜接產物是N端和C端都帶有維護基的維護肽,要脫去維護基後才幹得到自由的肽。假設肽鏈不是到此為止,而是還需求從N端或C端延長肽鏈的話,則可以先選擇性地脫去X或Q,然後再同新的N維護氨基酸(或肽)或C維護的氨基酸(或肽)中止第二次銜接,並依次不時重復下去,直到所需求的肽鏈長度為止。

關於長肽的多肽合成來說,普通有逐步增長和片段縮合兩種伸長肽鏈的方式,前者是由起始的氨基酸(或肽)開端。每銜接一次,接長一個氨基酸,後者則是用N維護肽同C維護肽縮合來得到兩者長度相加的新的長肽鏈。

關於多肽合成中含有谷氨酸、天冬氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、半胱氨酸等等帶側鏈功用團的氨基酸的肽來說,為了避免由於側鏈功用團所帶來的副反響,普通也需求用恰當的維護基將側鏈基團暫時維護起來。

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