测双荧光素酶的仪器有哪些

❶ 怎么使用多功能酶标仪检测双荧光素酶报告基因

可以咨询佳学基因的科研人员。佳学基因专注于基因检测和基因解码。

❷ 检测荧光素酶报告基因发出荧光的都有什么仪器 例如各有什么优缺点之类的

Luminex,荧光分光光度仪,荧光凝胶成像仪,液闪仪 ,荧光酶标仪,荧光显微镜
都很贵.推荐荧光酶回标仪和荧光显微镜.
Luminex是液体芯片答测定,同时检测30个目的蛋白,定量,灵敏.
荧光分光光度仪用途比较局限,不方便.
荧光凝胶成像仪的对象是凝胶
液闪仪和luminex很像,但是只能检测一个蛋白或靶标
荧光酶标仪就是酶标仪,但是可以检测荧光信号,同时可以测定至少96个样品的单一靶标
荧光显微镜不能定量,但非常直观,可以看到是那些细胞发光,以及发光的部位.而且可以同时看到1-3种荧光,价格比前者低些.

❸ 实验室常见的仪器有哪些

以喜格规划设计的实验室一般都有超净工作台、冰箱、电子天平、手提式高压蒸汽灭回菌器、电热恒答温水浴锅、电热蒸馏水器、双目生物显微镜、电热恒温培养箱、离心机、马弗炉（高温炉）、分光光度计、pH计、酶联免疫检测仪

❹ 检测荧光素酶报告基因发出荧光的都有什么仪器

成像的话一般荧光显微镜、激光共聚焦显微镜；定量的话一般就是流式细胞仪吧。

❺ 如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶

报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响，例如培养细胞的数目和活力的差别、细胞转染和裂解的效率、以及加样操作过程中引起的变异。Dual-Luciferase双荧光素酶报告基因检测系统中含有在同一细胞中同时表达的两种荧光素酶。共转染的“对照”报告基因会作为内对照，减小细胞活性和转染效率对实验的影响。因此双报告系统减少了外部干扰，使得实验数据更可信。Promega提供了一种先进的双报告基因技术（Dual-reporter assays）,结合了萤火虫荧光素酶测试和海肾荧光素酶测试，该技术同时使用两个独立的报告基因以提高实验的准确性，Biotek synergy 系列微孔板检测仪作为双报告基因的检测分析平台获得了Promega DLR 认证。
在双报告基因系统中，通常一个报告基因用于检测特定实验条件下待测物的反应，即“实验”reporter，另一个报告基因用来检测实验条件，类似于内部对照，用于校准“实验”reporter的数据。通过这种方法，可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性，例如：转染效率、细胞活性、细胞裂解差异以及加样操作过程中引起的差异。Promega公司的Dual-Luciferase系统利用萤火虫和海肾荧光素酶的活性分别检测实验组和对照组。萤火虫荧光素酶是一种分子量为61KD的单体酶，分两步催化虫荧光素的氧化反应，产生560nm的光，海肾荧光素酶是一种分子量为36KD的单体酶，催化海肾荧光素的氧化反应，产生中心波长为480nm的蓝光。萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶没有种源同源性，对应不同的反应底物，反应中没有任何的交叉干扰。

❻ 检测荧光素酶的酶标仪有什么要求呢

荧光素酶检测时，反应是一个很弱的自发光反应，无需外来光源，需要使用发版光检权测仪来检测。普通酶标仪检测的是吸光度，检测原理与荧光素酶完全不同，无法检测荧光素酶。
参考：http://www.lumflu.com/A_Info.asp?id=29

❼ 检测荧光素酶报告基因发出荧光的都有什么仪器

luminex,
荧光分光光度仪，荧光凝胶成像仪，液闪仪
，荧光酶内标仪，荧光显微容镜
都很贵。推荐荧光酶标仪和荧光显微镜。
luminex是液体芯片测定，同时检测30个目的蛋白，定量，灵敏。
荧光分光光度仪用途比较局限，不方便。
荧光凝胶成像仪的对象是凝胶
液闪仪和luminex很像，但是只能检测一个蛋白或靶标
荧光酶标仪就是酶标仪，但是可以检测荧光信号，同时可以测定至少96个样品的单一靶标
荧光显微镜不能定量,但非常直观，可以看到是那些细胞发光，以及发光的部位。而且可以同时看到1-3种荧光，价格比前者低些。

❽ 双荧光素酶检测启动子和荧光定量检测启动子有什么不同

荧光素酶（Luciferase）是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称，来自于自然界能够发光的生物。

自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发光鱼、发光甲虫等。细菌荧光素酶对热敏感，因此在哺乳细胞的应用中受到限制。目前，以北美萤火虫虫(Photinus pyralis)来源的荧光素酶基因应用的最为广泛，该基因可编码550个氨基酸的荧光素酶蛋白，是一个61kDa的单体酶，无需表达后修饰，直接具有完全酶活。

发光机制

生物荧光实质是一种化学荧光。萤火虫荧光素酶在Mg2+、ATP、O2的参与下，催化D2荧光素(D2luciferin) 氧化脱羧，产生激活态的氧化荧光素，并放出光子，产生550～580 nm 的荧光，其化学反应式如下。

这种无需激发光就可发出偏红色的生物荧光，其组织穿透能力明显强于绿色荧光蛋白(GFP)。荧光素酶是靠酶和底物的相互反应发光，特异性很强，灵敏度高，由于没有激发光的非特异性干扰，信噪比也比较高。

二、荧光素酶报告基因的检测流程

1、重组质粒制备: 制备含有待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒；
2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株，通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等；
3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染，设置不同的检测时间点，一般为24h/48h；
4、外界干预: 转染后，可进行物理/化学/病毒等的相应刺激；
5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作；
6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。

三、荧光素酶报告基因的优点

1、优越的灵敏度，比Westernbloting灵敏度高1000倍以上；
2、内源性低，哺乳动物无内源性表达；
3、荧光素酶检测不受细胞内其他物质影响；
4、发光检测，检测方便；
5、灵敏度高，10‐20摩尔荧光素酶分子；
6、检测范围广，大于7个数量级。

❾ 检测荧光素酶报告基因发出荧光的都有什么仪器

Luminex, 荧光分光光度仪，来荧光凝胶成源像仪，液闪仪 ，荧光酶标仪，荧光显微镜
都很贵。推荐荧光酶标仪和荧光显微镜。
Luminex是液体芯片测定，同时检测30个目的蛋白，定量，灵敏。
荧光分光光度仪用途比较局限，不方便。
荧光凝胶成像仪的对象是凝胶
液闪仪和luminex很像，但是只能检测一个蛋白或靶标
荧光酶标仪就是酶标仪，但是可以检测荧光信号，同时可以测定至少96个样品的单一靶标
荧光显微镜不能定量,但非常直观，可以看到是那些细胞发光，以及发光的部位。而且可以同时看到1-3种荧光，价格比前者低些。

❿ 双荧光素酶报告基因一定要在工具细胞上做吗

报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响，例如培养细胞的数目和活力的差别、细胞转染和裂解的效率、以及加样操作过程中引起的变异。Dual-Luciferase双荧光素酶报告基因检测系统中含有在同一细胞中同时表达的两种荧光素酶。共转染的“对照”报告基因会作为内对照，减小细胞活性和转染效率对实验的影响。因此双报告系统减少了外部干扰，使得实验数据更可信。Promega提供了一种先进的双报告基因技术（Dual-reporter assays）,结合了萤火虫荧光素酶测试和海肾荧光素酶测试，该技术同时使用两个独立的报告基因以提高实验的准确性，Biotek synergy 系列微孔板检测仪作为双报告基因的检测分析平台获得了Promega DLR 认证。
在双报告基因系统中，通常一个报告基因用于检测特定实验条件下待测物的反应，即“实验”reporter，另一个报告基因用来检测实验条件，类似于内部对照，用于校准“实验”reporter的数据。通过这种方法，可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性，例如：转染效率、细胞活性、细胞裂解差异以及加样操作过程中引起的差异。Promega公司的Dual-Luciferase系统利用萤火虫和海肾荧光素酶的活性分别检测实验组和对照组。萤火虫荧光素酶是一种分子量为61KD的单体酶，分两步催化虫荧光素的氧化反应，产生560nm的光，海肾荧光素酶是一种分子量为36KD的单体酶，催化海肾荧光素的氧化反应，产生中心波长为480nm的蓝光。萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶没有种源同源性，对应不同的反应底物，反应中没有任何的交叉干扰。