用什么仪器看蛋白晶体图
① 考马斯亮蓝法测蛋白质含量用到哪些仪器
蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化,从而改变这些染料的专光吸收。在些基础上发展了蛋属白质染色测定方法。涉及的指示剂有甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿和溴甲酚紫。目前广泛使用的染料是考马斯亮蓝。
考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质通过范德华键结合后,变为蓝色,且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律,可在595nm处比色测定。2—5分钟即呈最大光吸收,至少稳定1小时。在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内均可。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。缓冲液浓度过高时,改变测定液pH值会影响显色。考马斯亮蓝染色能力强,比色杯不洗干净会影响光吸收值,不可用石英怀测定
② 用什么软件可以做出蛋白质三聚体图
PyMol
专门的蛋白质作图软件。
现在发表的文章都是用这个作图的。
③ 观察维生素c晶体需要用到什么仪器
病情分析:
维生素C(Vitamin C ,Ascorbic Acid)又叫L-抗坏血酸,是一种水溶性维生素.食物中的维生素C被人体小肠上段吸收.一旦吸收,就分布到体内所有的水溶性结构中,正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C,最高储存峰值为3000mg维生素C.正常情况下,维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出;另一部分可直接由尿排出体外.
指导意见:
[1]维生素c对人体的作用
近代研究表明VC对人体健康至关重要:
1.胶原蛋白的合成需要维生素C参加,所以VC缺乏,胶原蛋白不能正常合成,导致细胞连接障碍.人体由细胞组成,细胞靠细胞间质把它们联系起来,细胞间质的关键成分是胶原蛋白.胶原蛋白占身体蛋白质的1/3,生成结缔组织,构成身体骨架.如骨骼,血管,韧带等,决定了皮肤的弹性,保护大脑,并且有助于人体创伤的愈合.
2.坏血病.血管壁的强度和VC有很大关系.微血管是所有血管中最细小的,管壁可能只有一个细胞的厚度,其强度,弹性是由负责连接细胞具有胶泥作用的胶原蛋白所决定.当体内VC不足,微血管容易破裂,血液流到邻近组织.这种情况在皮肤表面发生,则产生淤血,紫癍;在体内发生则引起疼痛和关节涨痛.严重情况在胃,肠道,鼻,肾脏及骨膜下面均可有出血现象,乃至死亡.
3.牙龈萎缩,出血.健康的牙床紧紧包住每一颗牙齿.牙龈是软组织,当缺乏蛋白质,钙,VC时易产生牙龈萎缩,出血.
4.预防动脉硬化.可促进胆固醇的排泄,防止胆固醇在动脉内壁沉积,甚至可以使沉积的粥样斑块溶解.
5.是一种水溶性的强有力的抗氧化剂.可以保护其它抗氧化剂,如维生素A,维生素E,不饱和脂肪酸,防止自由基对人体的伤害.
6.治疗贫血.使难以吸收利用的三价铁还原成二价铁,促进畅道对铁的吸收,提高肝脏对铁的利用率,有助于治疗缺铁性贫血.
7.防癌.丰富的胶原蛋白有助于防止癌细胞的扩散;VC的抗氧化作用可以抵御自由基对细胞的伤害防止细胞的变异;阻断亚硝酸盐和仲胺形成强致癌物亚硝胺.曾有人对因癌症死亡病人解剖发现病人体内的VC含量几乎为零.
8.保护细胞,解毒,保护肝脏.在人的生命活动中,保证细胞的完整性和代谢的正常进行至关重要.为此,谷胱甘肽和酶起着重要作用.
谷胱甘肽是由谷氨酸,胱氨酸和甘氨酸组成的短肽,在体内有氧化还原作用.它有两种存在形式,即氧化型和还原型,还原型对保证细胞膜的完整性起重要作用.VC是一种强抗氧化剂,其本身被氧化,而使氧化型谷胱甘肽还原为还原型谷胱甘肽,从而发挥抗氧化作用.
酶是生化反应的催化剂,有些酶需要有自由的琉基(-SH)才能保持活性.VC能够使双硫键(-S-S)还原为-SH,从而提高相关酶的活性,发挥抗氧化的作用.
从以上可知,只要VC充足,则VC,谷胱甘肽,-SH形成有力的抗氧化组合拳,清除自由基,阻止脂类过氧化及某些化学物质的毒害作用,保护肝脏的解毒能力和细胞的正常代谢.
9.提高人体的免疫力.
白细胞含有丰富的VC,当机体感染时白细胞内的VC急剧减少.VC可增强中性粒细胞的趋化性和变形能力,提高杀菌能力.
促进淋巴母细胞的生成,提高机体对外来和恶变细胞的识别和杀灭.
参与免疫球蛋白的合成.
提高CI补体酯酶活性,增加补体CI的产生.
促进干扰素的产生,干扰病毒mRNA的转录,抑制病毒的增生.
10.提高机体的应急能力.人体受到异常的刺激,如剧痛,寒冷,缺氧,精神强刺激,会引发抵御异常刺激的紧张状态.该状态伴有一系列身体,包括交感神经兴奋,肾上腺髓质和皮质激素分泌增多.肾上腺髓质所分泌的肾上腺素和去甲肾上腺素是有酪氨酸转化而来,在次过程需要VC的参与.
维生素C是一种水溶性维生素(其水溶液呈酸性)化学式为C6H8O6,人体缺乏这种维生素C易得坏血症,所以维生素C又称抗坏血酸.维生素C易被空气中的氧气氧化.在新鲜的水果,蔬菜,乳制品中都含维生素C,如新鲜的橙汁中维生素C的含量在500mg/L左右.
生活护理:
适宜人群
1,容易疲倦的人.
2,在污染环境工作的人.体内维生素C高的人,几乎不会再吸收铅,镉,铬等有害元素.
3,嗜好抽烟的人.抽烟的人多吃含维生素C的食物有助提高细胞的抵抗力,保持血管的弹性,消除体内的尼古丁.
4,从事剧烈运动和高强度劳动的人.这些人因流汗过多会损失大量维生素C,应及时予以补充.
5,坏血病患者.此病是因饮食中缺乏维生素C,使结蹄组织形成不良,毛细血管壁脆性增加所致,应多食含维生素C丰富的食物.
6,脸上有色素斑的人.维生素C有抗氧化作用,补充维生素C可抑制色素斑的生成,促进其消退.
7,长期服药的人.服用阿司匹林,安眠药,抗癌变药,四环素,钙制品,避孕药,降压药等,都会使人体维生素C减少,并可引起其它不良反应,应及时补充维生素C.
8,白内障患者.维生素C是眼内晶状体的营养要素,维生素C的摄入量不足,是导致白内障的因素之一,患者应多补充维生素C.
④ 测定蛋白质的构型和功能要用什么仪器,有哪些步骤
你好,很高兴回答你的问题。
构型这个概念是指 一个有机分子中各个原子特有的固定的空间排列。这种排列不经过共价键的断裂和重新形成是不会改变的。构型的改变往往使分子的光学活性发生变化。蛋白质的构型就是一级结构,指其氨基酸排列顺序。
测定蛋白质的构型的主要有两种方法:Edman降解(Edman degradation)和质谱法。
EDMAN降解法测序是经典的方法,通过从多肽链游离的N末端(或者C末端,但是很少)测定氨基酸残基的序列的过程。N末端氨基酸残基被苯异硫氰酸酯修饰,然后从多肽链上切下修饰的残基,现在一般都是自动测序仪。
质谱法测蛋白只要是利用生物质谱仪,比如ESI-Q-TOF,ESI-IT-Obitraq。利用特异的酶将蛋白切成肽段, 然后通过质谱方法进行测定,产生数据或通过重头比对,或者通过生物信息学中数据库搜索的方法推断出肽段序列,然后再由肽段序列拼接处蛋白序列。这种方法是近些年来随着蛋白质组学的发展而广泛被使用,但是对于蛋白完整序列测定需要较强的生物信息学技术。
整体而言, EDMAN降解法准确, 但是耗时长, 而且对于所测定的肽段要求很高, 不能太长, 不能太难修饰等等, 一般能测个20-50碱基不错了。而质谱法方法快速,但是准确性比EDMAN降解法略差。
另外,楼主讲的蛋白功能测定,不同的蛋白质功能各异,蛋白功能主要通过生物学实验反复验证次得到,这个比较复杂,没有固定的模式,要逐一研究。
另外,像核磁仪可以用来研究蛋白的构象或者说晶体结构,表面等离子共振仪器可以用来研究蛋白蛋白相互作用,等等,蛋白质是未来有限的生物研究资源,现在全世界对蛋白质的研究热情都很高。也有许多相关的基础科教书,楼主感兴趣可以去看看。
纯手工打造,希望采纳哦。
⑤ 对晶体研究一般会用到哪些仪器
研究晶体结构(还有对称结构类型),会用到XRD
研究晶体介电性质,会用到专门的内压电仪器容
研究晶体的非线性光学性质,损伤阈值,等,会用到激光器
研究晶体的围观电畴结构,会用到 偏光显微镜,TEM, SEM ,环境SEM等
希望采纳!
激光器当然会用到
⑥ 怎么才能判断试剂盒筛出来蛋白晶体
怎么才能判断试剂盒筛出来蛋白晶体
您好,线粒体蛋白提取试剂专盒产品特点:1.离心吸属附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用,
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀.
⑦ 检测蛋白质结构的仪器分析方法有哪些
测结构用核磁,同分异构都给你分辨出来。其次就是液质了,首选LC-TOF
⑧ 现在国内检测蛋白质用什么方法涉及到哪些化学仪器
目前食品中蛋白质的测定方法有蛋白质自动分析仪,近红外自动测定仪,紫外分光光度法以及凯氏定氮法等。本文采用纳氏试剂作为显色剂测定食品中蛋白质含量,适用范围广,可用于各类食品及保健食品的检测。用本法对标准品、质控样品进行测定获得满意结果,对批量样品的快速测定更具有实用性。现将结果报告如下。
材料与方法
仪器与试剂 WFZ800-D3型紫外分光光度计(北京第二光学仪器厂)。分析纯硫酸、硫酸铜、硫酸钾。(1)纳氏试剂:称取碘化汞100g及碘化钾70g,溶于少量无氨蒸馏水中,将此溶液缓缓倾入己冷却的32%氢氧化钠溶液500ml中,并不停搅拌,再用蒸馏水稀释至1L,贮于棕色瓶中,用橡皮塞塞紧,避光保存。(2)硫酸铵标准储备溶液(1.0g/L):精确称取经硫酸干燥的硫酸铵0.4720g,加水溶解后移入100mL容量瓶中,并稀释至刻度,混均此液每毫升相当于1.0mgNH3-N(10℃下冰箱内储存稳定1年以上)。(3)硫酸铵标准使用溶液(0.01g/L):用移液管精密吸取1.0ml标准储备液(1.0g/L)于100ml容量瓶内,加水稀释至刻度,混匀,此溶液每毫升相当于10.0μg NH3-N。
方法
标准曲线绘制 取25ml比色管7支,分别准确吸取0.01g/L硫酸铵标准使用液0.00,0.5,1.0,3.0,5.0,7.0,10.0ml(相当于标准0.0,5.0,10.0,30.0,50.0,70.0,100.0μg),加水至10ml刻度,于标准系列管中各加2ml纳氏试剂,混匀后放置10min,移入1cm比色皿内,以零管为参比,于波长420mm处测量吸光度,以标准管含量为横坐标(μg),对应的吸光度(A)值为纵坐标绘制标准曲线。
样品测定 选择牛奶和奶粉为检测样品。精密称取样品0.1~2.0g置于250ml三角瓶中,加入0.2gCuSO4、1.0gK2SO4、硫酸10ml,先小火加热,待内容物全部炭化,泡沫停止后,加大火力至液体呈蓝色,使H2SO4剩余量约为3ml左右为止,室温放冷后,沿瓶壁慢慢加入10ml水,移入100ml容量瓶中,用少量蒸镏水洗三角瓶3次,洗液全部并入容量瓶中,冷却,加蒸馏水至刻度,混匀。测定时取0.5ml,加水至10ml刻度,以后操作同标准曲线。同时做空白试验。
计算公式
X=c×Fm×V2V1×1000×1000×1000
式中:X-试样中蛋白质含量(g/100g或g/100ml)
C-试样测定液中扣除空白后氮的含量(μg)
V1-试样消化液定容体积(ml)
V2-测定用消化液体积(ml)
m-样品质量(g)或体积(ml)
F-氮换算为蛋白质的系数。
蛋白质的氮含量一般为15%~17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质,乳制品为6.38,面粉为5.7,肉及肉制品为6.25,大豆为5.71。
结果
2.1 测定波长选择 含氮量为30μg的标准管在显色后,在波长400~440mm范围内每间隔5nm进行测定,最大吸收波长为420mm。
显色剂用量选择 含氮量为30μg的标准管分别加入不同量的纳氏试剂,在420mm的波长下分别测定其吸光度结果。纳氏试剂显色剂加入量为1.5~3.0ml时吸光度基本无变化,本法选择加入纳氏试剂2.0ml。
显色时间及稳定性 含氮量为30μg的标准管经显色后,分别在10,30min,1,2,4,8h进行测定。显色后10min~8h内吸光度稳定无变化。本法选显色10min后测定。
标准曲线 回归方程:y=0.016X-1.5×10-3,r=0.9998,最佳线性范围0.0~100μg。
精密度 牛乳和奶粉2种样品分别取6份按本法重复测定6次,牛乳和奶粉精密度测定结果:平均数分别为3.06,23.50;标准差分别为±0.029,±0.073;相对标准偏差分别为0.31%,0.94%。
对2种样品利用标准加入法作回收试验(表1) 结果可见,回收率为95.50%~99.44%。
2种方法测定结果比较 分别用GB/T5009.5-2003凯氏定氮法与本法测定。结果显示,2种分析方法的测定结果差异无统计学意义(t=0.026,P>0.05)。
测定标准物质 用本法测定4种不同的蛋白质标准物质,测定结果与标准物质含量一致。
以纳氏试剂作为显色剂快速测定食品中蛋白质的方法特点简单、快速,适用于批量样品测定。在碱性条件下NH3-N与纳氏试剂反应生成的黄色化合物稳定。本法与国标凯氏定氮法进行比较t=0.026,P<0.05,n=32,2种方法测定结果无明显差异。测定范围广,线性范围宽0.0~100.0μg;精密度高;相对标准偏差为0.31%~0.94%;回收率好,加标回标率为95.50%~99.44%。用本法测定标准物质结果一致,用于质量控制样本测定结果满意。本法仪器试剂简单,易于基层普及,有利于推广应用。