引物合成需要什么仪器

1. PCR扩增除引物需要花钱合成,还有哪些试剂需要购买,哪些试剂需要合成

需要购抄买的 做pcr扩增袭用的试剂: PCRmix,或者酶，dntp等，电泳的试剂：胶，buffer，核酸染料，marker。如果做荧光定量或者测序，需要荧光修饰的引物，还得合成。
耗材:pcr板，吸头，pcr管。还有很多别的东西。华科鉴联基因科技提供所有pcr的相关试剂和耗材,仪器

2. pcR仪与DNA合成仪的区别是什么

PCR仪合成的也是双链DNA，简单点说，PCR仪是利用现有基因与相应的引物及DNA聚合酶内实现短时间容对于目标基因的大量扩增。
DNA合成仪是在体外合成设计的基因，比如PCR需要的引物，就需要用DNA仪合成。

PCR仪PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。
DNA合成仪是设计用于合成结构上类似DNA或RNA的寡核苷酸的自动化仪器。一般应用于固相合成法，每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上，加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。所用化学反应和操作细节随不同的仪器而改变，最广泛应用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。

3. 求PCR引物合成的具体方法

这个一般交给公司合成，华大就可以合成。自己要合成除非有相应的仪器。公专司一般应属该用化学法合成，就是提供基团保护的核苷酸，然后去掉某一保护基团，催化链延伸，然后再加入另一种核苷酸。原理很简单，就是序列正确性的控制很难，那些仪器好像是在很微小的体系里反应，不断的洗掉旧的核苷酸，加入新的核苷酸，来合成正确序列。

4. DNA合成仪与PCR仪有什么区别

合成仪无需模板和引物、DNA聚合酶，而是按照人们预先设定的DNA序列，从无到有，从头内合成（denove），容以循环的化学反应合成出DNA链（第一个是挂在固相载体上的，以后每次反应通过提供底物-连接反应-洗涤等步骤），而且是单链。
PCR仪需要模板、引物和聚合酶，本质是生物合成，一般采用一对引物，合成的是双链DNA，无需固相载体。合成的模板序列可以是已知的也可以是未知的。
二者合成目的一般也不同。

5. PCR技术是如何合成引物的

目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。

第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应，脱去其5′-羟基的保护基团DMT，获得游离的5′-羟基。
第二步，合成DNA的原料，亚磷酰胺保护核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的3′端被活化，5′-羟基仍然被DMT保护，与溶液中游离的5′-羟基发生缩合反应。
第三步，带帽(capping)反应，缩合反应中可能有极少数5′-羟基没有参加反应(少于2%)，用乙酸酐和1-甲基咪唑终止其后继续发生反应，这种短片段可以在纯化时分离掉。
第四步，在氧化剂碘的作用下，亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯。
经过以上四个步骤，一个脱氧核苷酸被连接到固相载体的核苷酸上。再以三氯乙酸脱去它的5′-羟基上的保护基团DMT，重复以上步骤，直到所有要求合成的碱基被接上去。合成过程中可以观察TCA处理阶段的颜色判定合成效率。通过氨水高温处理，连接在CPG上的引物被切下来，通过OPC, PAGE等手段纯化引物，成品引物用C18浓缩,脱盐，沉淀。沉淀后的引物用水悬浮，测定OD260定量，根据定单要求分装。

6. 化学合成实验需要什么设备

电泳
离心机
干燥室干燥箱、电动离心机和隔焰炉等气相色谱、液相色谱也要用到的
我是做实验室仪器设备的
呵呵

7. 引物是怎么合成的

自己把引物序列设计好，（邮件）填表把它发送到上海生工公司，他们会引物合成好，装在EP管里寄给你啊。

8. 引物是如何合成的

亚磷酰胺三酯抄法是将DNA固定在固相载体上袭完成DNA链的合成的，合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的，相邻的核苷酸通过3'→5'磷酸二酯键连接。
第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应，脱去其5'-羟基的保护基团DMT，获得游离的5'-羟基；
第二步，合成DNA的原料，亚磷酰胺保护核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的3'端被活化，5'-羟基仍然被DMT保护，与溶液中游离的5'-羟基发生缩合反应。
第三步，带帽(capping)反应，缩合反应中可能有极少数5'-羟基没有参加反应(少于2%)，用乙酸酐和1-甲基咪唑终止其后继续发生反应，这种短片段可以在纯化时分离掉。
第四步，在氧化剂碘的作用下，亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯。

9. PCR引物怎么合成

这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列版退火的primer要符合下面的 一些条件权
1) 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的primer同样会降低特异性,并且降低产量
2) GC% 40%~60%
3) 5'端和中间序列要多GC,以增加稳定性
4) 避免3'端GC rich, 最后3个BASE不要有GC,或者最后5个有3个不要是GC (有人说：3' 端最好是 GC/CG/CC/GG。)
5) 避免3'端的互补, 否则容易造成DIMER
6) 避免3'端的错配
7) 避免内部形成二级结构
8) 附加序列(RT site, Promoter sequence)加到5'端, 在算Tm值时不算,但在检测互补和二级结构是要加上它们
9) 使用兼并primer时, 要参考密码子使用表,注意生物的偏好性,不要在3'端使用兼并primer,并使用 较高的primer浓度(1uM-3uM)
10) 最好学会使用一种design software. PP5,Oligo6,DNAstar, Vector NTI, Online design et al.

10. 做化学合成一般要用到什么分析仪器

做化学合成一般要用到的分析仪器：
1、滴定管、容量瓶、移液管；

2、分析天平；比重计（密度计）；
3、pH计；浊度计；电导率计；
4、可见、紫外光度计；红外光谱仪；
5、气相色谱仪；